HT29/219人结肠癌细胞

细胞属性：

 细胞特性

种属来源:人

性别年龄:女性，54岁

组织来源:结直肠腺癌

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:EMEM+ 10% heat inactivated fetal bovine serum (FBS)+1%NEAA37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

1. 细胞系背景与特征

来源与特性

母系来源：HT-29/219是HT-29结肠癌细胞系的 亚克隆株，通过单细胞克隆筛选获得，保留母系核心特征但存在功能性差异。

关键差异：

增强的侵袭性：Transwell实验显示迁移能力较母系提升30-50%（可能与EMT标志物上调相关）。

化疗敏感性变化：对5-FU耐药性增强，但对奥沙利铂敏感性部分保留（需验证ABC转运蛋白表达）。

分子特征

遗传一致性：保留HT-29的 PIK3CA E545K突变 和 TP53 R273H突变。

新增变异：

部分文献报告 CDH1（E-cadherin）表达下调（与侵袭性相关）。

PD-L1表达浮动（需通过流式细胞术验证克隆间差异）。

2. 核心研究应用

转移机制研究

体内模型：脾脏注射后肝转移效率较母系提高（4周成瘤率＞80%）。

EMT标记分析：检测Vimentin、N-cadherin上调及E-cadherin丢失。

药物开发平台

靶向治疗：测试PI3K抑制剂（如Alpelisib）在亚克隆中的耐药性演变。

免疫治疗：评估PD-1抗体联合TGF-β抑制剂对肿瘤微环境的重编程作用。

类器官与3D模型

与癌症相关成纤维细胞（CAFs）共培养可模拟 促转移微环境（需检测IL-6/IL-8分泌）。

3. 实验操作规范

培养条件优化

培养基：McCoy's 5A + 10% FBS + 1% NEAA（含2 mM GlutaMAX）。

传代要点：

消化时间缩短至3分钟（0.25%胰酶-EDTA），避免细胞团块形成。

接种密度：1×10? cells/cm2（低密度维持侵袭表型）。

质量控制

分子验证：每两代检测PIK3CA突变（ddPCR）及STR分型（比对母系HT-29）。

功能验证：季度重复Transwell侵袭实验（Matrigel预铺，24小时评估）。

公司正在出售的产品：