COLO 829人黑素瘤细胞 新品

                                                          COLO 829人黑素瘤细胞
产品信息：

一、 COLO 829 细胞基本参数

细胞类型  人黑色素瘤细胞 (Human Melanoma Cell Line)

组织来源  皮肤 (Skin) / 转移性黑色素瘤

供体信息  45岁，白人男性

生长特性  贴壁生长 (Adherent)

关键基因突变  BRAF V600E 突变 (常见)、CDKN2A缺失

生物安全等级  BSL-2

主要应用  黑色素瘤机制研究、靶向药筛选、免疫共培养

二、 培养条件与操作指南

�� 1. 推荐培养基体系

COLO 829 细胞对培养基适应性较强，通常使用以下配方：

基础培养基： RPMI-1640 (最常用) 或 DMEM (高糖)。

添加物：

10% 胎牛血清 (FBS)：提供营养和生长因子。

1% 双抗 (Penicillin/Streptomycin)：预防细菌污染。

pH值： 7.2 - 7.4。

2. 培养环境

温度： 37℃

气体环境： 5% CO₂ + 95% 空气

湿度： 饱和湿度

�� 3. 传代操作（关键步骤）

COLO 829 细胞贴壁相对较牢，消化时需要耐心观察。

消化液： 推荐使用 0.25% 胰蛋白酶 - 0.53 mM EDTA。

消化时间： 37℃孵育 1-3 分钟。

观察： 显微镜下观察细胞间隙变大，细胞变圆并开始脱落。

终止： 加入含血清的完全培养基终止消化（血清可抑制胰酶活性）。

吹打： 轻柔吹打使细胞完全脱落并分散。

离心： 1000 rpm 离心 5 分钟，弃上清。

重悬与分瓶： 弃去上清，加入新鲜完全培养基重悬，按 1:2 至 1:4 的比例进行传代（首次传代建议 1:2）。

换液频率： 每 2-3 天换液一次。

❄️ 4. 冻存与复苏

冻存液： 推荐使用 90% FBS + 10% DMSO，或专用无血清冻存液。

复苏： 快速 37℃水浴解冻（约 1 分钟），离心去除冻存液后重悬接种。

⚠️ 三、 培养中的注意事项

BRAF V600E 突变特性：

该细胞系携带 BRAF V600E 突变，这是黑色素瘤中最常见的驱动突变。这意味着它对 BRAF抑制剂（如维莫非尼/Vemurafenib）和 MEK抑制剂 通常敏感，常用于相关药物的体外药效验证。

运输状态处理：

常温运输（T25瓶）： 收到后请先用 75% 酒精擦拭瓶壁消毒，放入 37℃ 培养箱静置 3-4 小时。注意： 运输过程中可能会有少量细胞脱落漂浮，这是正常现象，离心收集后可继续培养。

干冰运输（冻存管）： 收到后若不立即复苏，应直接转入液氮或 -80℃ 冰箱保存。

消化控制：

该细胞对消化时间比较敏感。严禁消化过度，如果消化时间过长导致细胞完全漂浮且变圆，细胞活性会受到严重影响，可能导致细胞死亡或生长缓慢。

配对细胞系：

市场上存在 COLO 829L（淋巴结转移亚系），常与 COLO 829 配对使用，用于研究肿瘤的原发与转移机制。

�� 总结

COLO 829 是一种典型的贴壁型人黑色素瘤细胞，其培养难度中等。核心要点是理解其 BRAF 突变背景（用于靶向治疗研究）以及控制胰酶消化时间。它在黑色素瘤的药物敏感性测试和肿瘤免疫学研究中具有重要价值。

公司正在出售的产品：

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细胞具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。