COLO 829人黑素瘤细胞

细胞属性：

 细胞特性

种属来源:人

性别年龄:45 岁，白人男性

组织来源:皮肤

生长特性:贴壁生长

细胞形态:成纤维细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:RPMI 1640+10% Foetal Bovine Serum

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

1. 细胞背景

名称：COLO 829（ATCC CRL-1974）

类型：人皮肤恶性黑素瘤细胞系

起源：

来源于 转移性黑素瘤患者（具体临床背景未公开）

具有典型黑素瘤分子特征，常用于 靶向治疗 和 免疫治疗 研究

与COLO 829L（其淋巴结转移亚系）常作为配对模型使用

2. 关键特征

特征  说明

形态  贴壁生长，多形性（梭形/星形为主）

色素合成  低至中等水平黑色素（可诱导）

标志物  S100+、HMB-45+、Melan-A/MART-1+

基因突变  BRAF V600E突变（常见）、CDKN2A缺失

致瘤性  高致瘤性，裸鼠模型中可成瘤和转移

3. 培养条件

基础培养

培养基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1% 青霉素/链霉素

培养环境：37°C，5% CO?，湿度＞90%

传代频率：每3-4天（80%汇合时）

传代步骤

弃旧培养基，PBS洗涤1次

添加 0.25% 胰蛋白酶（含0.02% EDTA），37°C消化3-5分钟

加入含血清培养基终止消化，离心（1000 rpm, 5 min）

按 1:3~1:5 比例重悬接种

冻存方案

冻存液：90% FBS + 10% DMSO

冻存密度：1-2×10? cells/mL

程序：分步降温（4°C→-20°C→-80°C→液氮）

4. 研究应用

靶向治疗研究

BRAF抑制剂（如维莫非尼）敏感性测试

MEK抑制剂（如曲美替尼）与BRAF抑制剂的协同效应

免疫治疗研究

PD-1/CTLA-4抗体 治疗效果评估

肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）共培养实验

转移机制研究

Transwell侵袭实验（Matrigel涂层）

裸鼠尾静脉注射构建 肺转移模型

5. 质量控制

必需检测：

STR鉴定（防止HeLa等交叉污染）

BRAF V600E突变验证（ARMS-PCR或测序）

支原体检测（每2-3个月一次）

标志物确认：

免疫荧光检测 S100 和 HMB-45 表达

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