线粒体柠檬酸(MCA)含量测定试剂盒/分光光度法/48样

线粒体柠檬酸(MCA)含量测定试剂盒/分光光度法/48样

测定意义：

CA 是线粒体三羧酸循环的第一个中间产物，由柠檬酸合酶催化乙酰 CoA 与草酰乙酸合成，其含量是三羧酸循环强度的主要指标之一。

配合测定丙酮酸含量、丙酮酸脱氢酶活性、乙酰 CoA 含量、柠檬酸合酶活性和 CA 含量，其中（1）丙酮酸含量和丙酮酸脱氢酶活性变化可以反映糖酵解进行程度，（2）综合分析丙酮酸含量、丙酮酸脱氢酶活性和乙酰 CoA 含量变化可以反映脂肪酸β-氧化途径提供的乙酰 CoA 情况，（3）乙酰 CoA 含量、柠檬酸合酶活性和 CA 含量变化可以反映三羧酸循环进行状况。

测定原理：

CA 在柠檬酸裂解酶的作用下，生成α-酮酸（草酰乙酸）；在弱酸性条件下，α-酮酸进一步与苯肼反应，生成相应的α-酮酸苯腙；α-酮酸苯腙在 330nm 处有吸收峰，该波长下吸光度的变化程度可反映出 CA 的含量。

自备仪器和用品：

分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1mL 石英比色皿、研钵和蒸馏水。

测定步骤：
空白管和标准管通常只需要各做一个。

注 意：

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。