PLC/PRF/5人肝癌细胞

商品属性

来源：1976年建系，源自莫桑比克男性原发性肝细胞癌（HCC）患者标本。

特性：

上皮样贴壁生长，AFP阳性，不分泌白蛋白，但持续产生HBsAg（ad亚型），不表达HBcAg或HBeAg。

含完整HBV基因组，可用于HBV相关研究、疫苗制备及抗病毒药物开发。

裸鼠异种移植可致瘤，核型与人类同源。

培养条件

专用培养基：RPMI-1640基础培养基，补充10%胎牛血清（FBS）及1%青霉素-链霉素（P/S）。

储存与运输：

培养基需避光保存于2℃–8℃，冷藏运输（冰袋），有效期3个月。

细胞冻存建议程序降温（每分钟降1–3℃至–80℃后转入液氮），避免–20℃长期保存。

质量控制：

无菌检测：细菌、真菌、支原体均为阴性，内毒素≤3 EU/mL。

细胞形态：贴壁生长良好，形态正常。

实验应用

研究领域：HBV病毒学、肝癌发病机制、疫苗抗原生产、药物筛选。

优势：相比原代肝细胞，具有稳定传代、条件可控、重复性高的特点。

传代方法

时机：细胞密度达 70%-80% 时进行传代（切勿长满度过高，否则易分化或死亡）。

消化液：0.25% 胰蛋白酶 - 0.53 mM EDTA。

消化时间：37℃消化 1-2 分钟。

操作要点：

弃去旧培养基，用不含钙镁的 PBS 润洗 1 次。

加入胰酶消化，镜下观察，待细胞间隙变大、细胞变圆并脱落时，立即加入含血清的培养基终止消化。

吹打：轻柔吹打使细胞完全脱落并混匀。

离心：1000 rpm 离心 3-5 分钟，弃上清。

重悬与接种：用新鲜完全培养基重悬沉淀，按 1:2 至 1:3 的比例传代。

注意事项

污染控制：严格无菌操作，定期检测细胞污染（细菌、霉菌、霉浆菌等）。

冻存复苏：避免冰晶损伤，建议使用程序降温仪或直接转移至–80℃。

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