LN229人胶质瘤细胞

商品属性

种属来源：人源，组织来源于右额顶枕叶胶质母细胞瘤（建系于1979年）。

细胞特性

生长特性：贴壁生长，上皮细胞样形态。

遗传背景：携带p53突变，可能缺失p16及p14ARF肿瘤抑制基因，保留野生型PTEN基因。

荧光标记（LN-229-LUC）：通过慢病毒转染携带Luc基因，需用0.5-1.0 μg/mL嘌呤霉素（puro）维持筛选。

培养条件

培养基：

基础培养基：DMEM。

添加成分：5%-20%胎牛血清（FBS）、1%青霉素-链霉素（PS），标记株需添加嘌呤霉素。

培养环境：

温度：37℃；气相：95%空气 + 5% CO₂。

操作流程

复苏步骤：

37℃水浴快速解冻细胞悬液（1mL），与5mL培养基混合后离心（1000 rpm，5分钟）。

弃上清，重悬于4-6mL培养基，接种至培养瓶或6cm皿中，次日换液并观察密度。

传代步骤：

弃培养基，PBS润洗后加入0.25%胰酶-EDTA（37℃，1-2分钟），显微镜下确认细胞变圆脱落。

终止消化（含血清培养基），吹打成单细胞悬液，按1:2至1:3比例分瓶。

冻存建议：使用冻存液（含10% DMSO）保存于液氮，避免反复冻融。

注意事项

无菌操作：全程在超净台中进行，避免污染。

细胞状态监测：定期STR鉴定，确保遗传稳定性。

标记株维持：LN-229-LUC需持续使用0.5 μg/mL嘌呤霉素。

应用与售后

研究应用：适用于胶质瘤机制研究、药物筛选及体内外成像（荧光标记株）。

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