LN-229人脑髓母细胞瘤贴壁细胞系

LN-229是一个上皮样细胞系于1979年从一位60岁白人女性胶质母细胞瘤患者的右侧额顶枕皮质中分离出来。该细胞系可用于神经科学研究。
该细胞系用于细胞凋亡的研究。

细胞在本库通过支原体检测（可供检测报告）。
细胞在本库通过STR检测（可供检测报告）。

STR鉴定结果：
Amelogenin: X,X
D5S818:11,12
D13S317: 10,11
D7S820: 8,11
D16S539: 12,12
vWA: 16,19
TH01: 9.3,9.3
TPOX: 8,8
CSF1PO: 12,12
D19S433: 12,17.2
D21S11: 29,30
D18S51: 13,15 人 白人 女性 脑；右额顶皮层占位；胶质母细胞瘤 贴壁生长（Adherent） 60 岁（60 years） 上皮细胞， 贴壁生长

LN-229人脑髓母细胞瘤贴壁细胞系细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a）、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4.按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

b）、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。

胶质母细胞瘤（Glioblastoma）

LN-229人脑髓母细胞瘤贴壁细胞系细胞冻存：

1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；

2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3、用适量的冻存液重悬细胞，并放置于冻存管中；

4、先将细胞冻存管放置于-20℃1.5h，然后将其移入-80℃。