kyse30人食道癌细胞

商品属性

细胞来源：食道鳞状细胞癌

形态特征：上皮细胞样，贴壁生长

培养条件与试剂

培养基配方（需自备）：

基础培养基：48% 1640培养基 + 48% F-12培养基

添加成分：

10%优质胎牛血清

1% GlutaMAX-1谷氨酰胺

1% 青霉素-链霉素双抗

培养环境：

温度：37℃

气体：95%空气 + 5% CO₂

湿度：70%-80%

细胞处理流程

1. 运输与保存

冻存细胞：干冰运输（-80℃保存或直接复苏），发现干冰挥发或污染需立即联系。

复苏活细胞：常温运输（T25瓶），收到后静置培养箱2-4小时再处理。

2. 接收后操作

消毒处理：75%酒精擦拭瓶壁，显微镜观察细胞状态并拍照留存（10×,20×各2-3张）。

贴壁细胞处理：

静置2-3小时后观察贴壁情况（60%以下密度补6-8mL新培养基；70%-80%以上需传代）。

首次传代推荐比例：1:2（使用新配制培养基）。

3. 复苏与传代

复苏步骤：

37℃水浴快速解冻细胞悬液，离心（1000rpm/5min）弃上清。

重悬于4-6mL完全培养基，培养过夜后换液。

传代步骤：

PBS洗涤细胞，加入0.25%胰蛋白酶消化1-2分钟（37℃）。

轻敲培养瓶使细胞脱落，加含血清培养基终止消化。

离心（1000rpm/8-10min）后重悬接种。

冻存要求

冻存液配方：90%无血清冻存液 + 10% DMSO。

注意事项

科研用途：仅限实验室研究，禁止转让或商业使用 。

培养基替换：运输用灌液培养基不可用于培养，需更换新配培养基 。

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