B901L人非小细胞肺癌细胞 新品

                                                          B901L人非小细胞肺癌细胞
产品信息：

B901L 细胞系基本参数

种属/来源  人源 (Human)；肺组织

供体信息  72岁女性

细胞形态  上皮细胞样 (Epithelial-like)

生长特性  贴壁生长 (Adherent)

疾病特征  非小细胞肺癌 (NSCLC)

培养基  RPMI-1640 (常用) 或 DMEM (高糖)

生物安全等级  BSL-1

�� 培养条件与参数

B901L 细胞的培养条件相对标准，但不同供应商提供的基础培养基可能略有差异。

1. 培养基配方

配方一 (常用)：RPMI-1640 培养基 + 10% 胎牛血清 (FBS) + 1% 双抗 (P/S)。

部分供应商建议添加 10mM HEPES。

配方二：DMEM (高糖) 培养基 + 10% FBS + 1% 双抗。

备注：运输途中使用的培养基（灌液）通常不可直接继续培养，需更换为新鲜配制的完全培养基。

2. 培养环境

温度：37℃

气体环境：5% CO₂ + 95% 空气

湿度：70% - 80%

�� 细胞培养操作步骤

1. 收货与适应 (针对 T25 培养瓶常温运输)

消毒与静置：收到细胞后，用 75% 酒精擦拭瓶身消毒，放入 37℃ 培养箱静置 3-4 小时，以稳定细胞状态。

换液：静置后，建议弃去运输用的培养基（或将其收集离心后取上清与新培养基混合使用），换用新鲜的完全培养基。

2. 细胞传代 (当细胞密度达 80%-90% 时)

B901L 为贴壁细胞，推荐传代比例为 1:2 至 1:5。

弃液与清洗：吸去旧培养基，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

消化：加入适量 0.25% 胰蛋白酶 (Trypsin-EDTA)，约 1 mL/瓶，置于 37℃ 培养箱消化 1-2 分钟。

镜检：在显微镜下观察，待细胞大部分变圆并脱落时，迅速拿回操作台。

终止与吹打：加入含血清的完全培养基终止消化，轻轻吹打使细胞完全脱落。

离心与分瓶：1000 RPM 离心 5 分钟，弃上清，用新鲜培养基重悬沉淀，按 1:2 或 1:3 的比例分装到新的培养瓶中。

3. 细胞冻存

冻存液：推荐使用 90% FBS + 10% DMSO，或使用商业化的无血清冻存液。

密度：建议冻存密度为 1×10⁶ 个活细胞/mL。

步骤：消化收集细胞，离心洗涤，用冻存液重悬，分装入冻存管。使用程序降温盒或置于 -80℃ 冰箱过夜，随后转入液氮罐长期保存。

⚠️ 注意事项与常见问题

运输培养基处理：运输用的培养基（灌液）通常含有高浓度血清或代谢废物，请务必弃去并更换新鲜培养基，否则容易导致细胞状态变差或死亡。

细胞脱落问题：部分 B901L 细胞贴壁可能不牢，在运输或清洗过程中容易脱落。如果发现悬浮细胞较多，可以将培养瓶中的液体收集离心，弃去上清，用胰酶轻轻吹打沉淀后重新接种。

STR 鉴定：作为科研细胞系，建议定期进行 STR 鉴定以确保细胞无交叉污染。

科研用途：该细胞系仅用于科研实验，不可用于临床治疗。

公司正在出售的产品：

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细胞具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。