人视网膜微血管内皮细胞;HRCEC

                                                          人视网膜微血管内皮细胞;HRCEC
产品信息：

这是一份关于人视网膜微血管内皮细胞（HRCEC）的详细说明、细胞特性及标准培养操作指南。

HRCEC 是研究视网膜血管性疾病（如糖尿病视网膜病变、黄斑变性）以及血管生成、炎症反应和药物透过血视网膜屏障能力的理想体外模型。

细胞基本信息

种属来源：人（Homo sapiens）

组织来源：视网膜微血管组织

生长特性：贴壁生长

鉴定标志：CD31 (PECAM-1) 阳性、vWF (血管假性血友病因子) 阳性

纯度：通常 >90%

培养基：内皮细胞专用培养基 (ECM) 或 DMEM + 10% FBS

细胞特性与应用

特征维度  详细描述

背景简介  来源于正常人视网膜组织，经过纯化培养，保留了微血管内皮细胞的特有功能。

屏障功能  具有形成紧密连接的能力，可用于构建体外血视网膜屏障模型。

主要应用  1. 糖尿病视网膜病变机制研究。

年龄相关性黄斑变性 (AMD) 研究。

视网膜血管新生及炎症研究。

药物对视网膜血管毒性或保护作用评价。

推荐培养体系

基础培养基：DMEM (高糖) 或 原代内皮细胞专用培养基 (ECM)

血清添加：10% 胎牛血清 (FBS)（若使用专用ECM，通常需额外添加配套生长添加剂和5%-10% FBS）

双抗添加：1% 青霉素-链霉素 (P/S)

包被条件：建议使用 明胶 (0.1%) 或 多聚赖氨酸 (PLL) 预先包被培养瓶，以促进贴壁。

培养环境：

温度：37℃

气体环境：95% 空气 + 5% CO

湿度：维持培养箱内湿度 >90%。

详细培养操作指南

1. 细胞复苏 (Thawing)

预热：37℃ 水浴锅预热完全培养基。

解冻：迅速将冻存管置于 37℃ 水浴中，1-2 分钟内快速摇晃融化。

转移：酒精消毒后转入超净台，将细胞悬液缓慢加入含 4-6 mL 预热培养基的离心管中。

离心：1000 rpm (约 250g) 离心 4-5 分钟。

接种：弃上清，用完全培养基重悬，接种至 明胶包被的 T25 培养瓶中。

细胞传代 (Passage)

HRCEC 为贴壁细胞。

观察：当细胞融合度达到 80-90% 时进行传代（切勿长满，否则易老化或脱落）。

清洗：弃去旧培养基，用不含钙、镁离子的 PBS 轻柔润洗 1 次。

消化：加入 0.25% 胰酶-EDTA (约 1-2 mL)，37℃ 培养箱消化 1-2 分钟。

镜下监控：显微镜下观察，待细胞间隙变大、细胞变圆并脱落。

终止：加入含血清的培养基终止消化，轻轻吹打混匀。

离心：1000 rpm 离心 5 分钟。

重悬与分瓶：按 1:2 到 1:5 的比例分瓶传代。

细胞冻存 (Freezing)

状态选择：选择对数生长期、形态良好（鹅卵石状）的细胞。

消化：弃去培养基，加入少量胰酶消化，待细胞变圆脱落。

收集：加入含血清的培养基终止消化，混匀后转移至离心管。

离心：1000 rpm 离心 5-10 分钟，弃上清。

重悬：加入配置好的冻存液（90% 完全培养基 + 10% DMSO）重悬细胞。

分装：转移至冻存管中，放入程序降温盒（-80℃ 过夜），随后转入液氮罐长期保存。

关键注意事项

贴壁较慢：HRCEC 属于原代或原代样细胞，贴壁速度比肿瘤细胞慢。传代后建议 2 天内不要晃动 培养瓶，以利于细胞充分贴壁。

消化时间：内皮细胞对胰酶敏感，消化时间过长会损伤细胞。通常 1-2 分钟即可，镜下观察到细胞变圆即刻终止。

运输脱落：由于运输震荡，收到的细胞可能会有部分脱落漂浮。请务必将瓶内液体转移至离心管，离心收集细胞，弃上清，用 PBS 清洗一次，再用完全培养基重悬后接种回培养瓶中。

血清批次：内皮细胞对血清质量较敏感，建议使用优质胎牛血清，以保证细胞生长状态。

无菌操作：所有操作必须在生物安全柜内严格无菌操作，并定期检测支原体。

公司正在出售的产品：

Anti-Mre11/HNGS1/FITC 荧光素标记DNA损伤关键蛋白Mre11抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Nck beta 英文名称： NCK衔接蛋白2抗体 0.2ml
Anti-PLASTIN3/T Plastin 丝束蛋白T Plastin抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	Anti-SLC24A5/FITC 荧光素标记可溶性载质转运蛋白SLC24A5抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
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Rhesus antibody Rh CIDEB CIDEB抗体 规格 0.2ml	BMPR-1A(Human Bone morphogenetic protein receptor 1A) ELISA Kit 人骨成型蛋白受体1A
Radical Fringe 英文名称： β1,3-N-乙酰糖基转移酶抗体 0.2ml	Rhesus antibody Rh LTB4-R2 白三烯B4受体2抗体 规格 0.1ml
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Anti-E.coli O6 (Escherichia coli O6)/FITC 荧光素标记大肠埃希杆菌O6抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Rhesus antibody Rh ERp29 内质网蛋白29抗体 规格 0.1ml
6-keto-PGF1a(Human 6-keto-prostaglandin F1a) ELISA Kit 人6酮素F1aMulti-class antibodies规格： 48T	Calcitonin 小鼠降钙素Multi-class antibodies规格： 48T
Anti-PAK1/FITC 荧光素标记p21激活激酶1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	人视网膜微血管内皮细胞;HRCECC19orf73 英文名称： 19号染色体开放阅读框73抗体 0.1ml
sLR(Mouse Leptin Soluble Receptor) ELISA Kit 小鼠可溶性瘦素受体Multi-class antibodies规格： 48T	Anti-Menin/Men1/FITC 荧光素标记Menin蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。