人肝癌细胞;HEPARG

                                                          人肝癌细胞;HEPARG
产品信息：

HepaRG 细胞是一种非常独特且珍贵的肝癌细胞系。与其他肝癌细胞（如 HepG2）不同，它在分化后能表现出与原代人肝细胞（PHH）极为相似的代谢功能，因此被广泛视为原代肝细胞的替代模型，常用于药物代谢、肝毒性评价及病毒性肝炎研究。

细胞基本信息

种属来源：人（Homo sapiens）

供体信息：女性，44岁，原发性肝癌患者

细胞形态：上皮细胞样

生长特性：贴壁生长（但贴壁较弱，非常容易脱落）

特殊性：具有干细胞特性，可分化为肝细胞样细胞和胆管细胞样细胞。

培养基：William's E Medium 或 RPMI-1640 + 10% FBS

细胞特性与应用

特征维度  详细描述

代谢功能  表达高水平的 I 相（如 CYP3A4, CYP1A2）和 II 相药物代谢酶，活性接近原代肝细胞。

核受体  完整表达关键核受体（如 PXR, CAR），可用于药物诱导研究。

病毒受体  表达 NTCP 受体，可被乙肝病毒（HBV）和丁肝病毒（HDV）自然感染。

主要应用  1. 药物代谢与药物相互作用（DDI）研究。

肝毒性评价（急/慢性毒性）。

HBV/HDV 体外感染模型。

推荐培养体系

基础培养基：William's E Medium（首选）或 RPMI-1640

血清添加：10% 胎牛血清 (FBS)

添加剂：

100 nM 氢化可的松琥珀酸钠

50 μM 2-巯基乙醇

（注：部分商业化试剂盒如 Gibco 或 ATCC 提供专用添加剂）

培养环境：

温度：37℃

气体环境：95% 空气 + 5% CO

湿度：维持培养箱内湿度 >90%。

详细培养操作指南

1. 细胞复苏 (Thawing)

HepaRG 细胞对冻存复苏过程较为敏感。

预热：37℃ 水浴锅预热完全培养基。

解冻：迅速将冻存管置于 37℃ 水浴中，1-2 分钟内快速摇晃融化。

转移：酒精消毒后转入超净台，将细胞悬液缓慢加入含 4-6 mL 预热培养基的离心管中。

离心：1000 rpm (约 250g) 离心 4-5 分钟。

接种：弃上清，用完全培养基重悬，接种至 胶原蛋白 I 型包被的培养瓶中。

细胞传代 (Passage)

注意：HepaRG 贴壁较弱，极易脱落，操作需格外轻柔。

观察：当细胞融合度达到 70-80% 时进行传代（切勿长满，否则容易分化过度导致状态变差）。

清洗：弃去旧培养基，用不含钙、镁离子的 PBS 轻柔润洗 1 次。

消化：加入 0.05% 胰酶 或低浓度胰酶（0.25% Trypsin-EDTA），37℃ 培养箱消化 1-2 分钟。

镜下监控：显微镜下观察，待细胞间隙变大、部分变圆即可。

终止：加入含血清的培养基终止消化，轻轻吹打混匀。

离心：1000 rpm 离心 5 分钟。

重悬与分瓶：按 1:2 到 1:3 的比例分瓶传代。

细胞冻存 (Freezing)

状态选择：选择处于对数生长期、形态良好的细胞。

计数：消化收集细胞，离心后重悬。

冻存液：推荐使用 90% 完全培养基 + 10% DMSO。

密度：调整密度至 cells/mL。

程序降温：使用程序降温盒，-80℃ 过夜，次日转入液氮罐。

关键注意事项

贴壁脆弱（重点）：HepaRG 细胞贴壁能力较弱，换液或清洗时流速不能过快，吹打要轻柔，否则容易成片脱落死亡。

包被处理：建议使用 胶原蛋白 I 型（Collagen I） 预先包被培养瓶，这能显著提高细胞的贴壁率和生长状态。

分化状态：HepaRG 细胞在培养过程中会自然分化，形成肝细胞样细胞和胆管细胞样细胞的共培养体系。这是正常现象，也是其具有代谢功能的基础。

运输脱落：由于贴壁弱，运输途中极易脱落。若收到漂浮细胞，必须离心收集（1000 rpm, 5 min），重悬后接种，否则细胞无法存活。

支原体检测：建议定期检测支原体，确保细胞无污染。

公司正在出售的产品：

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Hp-IgG(Mouse Helicobacter pylori IgG) ELISA Kit 小鼠幽门螺旋菌IgGMulti-class antibodies规格： 48T	Anti-ER- Beta/FITC 荧光素标记雌激素受体β 抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。