"HepaRG:人肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气的,大家争取做到因材施教,比如试试下面的“四步消化法”。(以难消化细胞为例),具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍(目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉)。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况把握)。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
KMH2细胞类似产品::SKNBE(2)细胞、ARIP细胞、PG-4 (S+L-)细胞
Super Tube细胞类似产品::SCCVII/St细胞、COR-L23/P细胞、TE5细胞
L cells (TK-)细胞类似产品::Karpas 422细胞、H1882细胞、OV-CA 432细胞
UMUC14细胞类似产品::Mono Mac 1细胞、CT26-clone 25细胞、MNNG-HOS细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:肝癌;女性
HepaRG:人肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
SBC3细胞类似产品::L-M[TK-]细胞、RPE1细胞、WERI Rb-1细胞
SNU1细胞类似产品::K-1735细胞、SNU449细胞、MM-1S细胞
U-87-MG细胞类似产品::MFHL-2细胞、A375细胞、T98 G细胞
购买细胞注意事项:1)收到细胞后首先观察细胞瓶是否完HAO,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系;2)仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等;3)用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次;4)建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。【细胞传代操作步骤】一、贴壁细胞传代:1)提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内;2)吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞;3)加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用;4)用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡;5)将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。二、悬浮细胞传代:1)将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min;2)弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液;3)将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
HepaRG:人肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:贴壁
细胞培养中常用设施及设备:实验室设计:细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,而洗刷消毒在另一室。常用设施及设备:1)超净工作台:也称净化工作台,分为侧流式、直流式和外流式三大类。2)无菌操作间:一般由更衣间、缓冲间和操作间三部分组成。操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱、离心机、倒置显微镜等。缓冲间可放置电冰箱、冷藏器及消毒HAO的无菌物品等。3)操作间:普通培养箱、离心机、水浴锅、定时钟、普通天平及日常分析处理物。4)洗刷消毒间:烤箱、消毒锅、蒸馏水处理器及酸缸等。5)分析室:显微镜、计算机及打印机等。
HREC细胞类似产品::H-1672细胞、J.E6-1细胞、PLC-PRF-5细胞
PLA-801D细胞类似产品::THP1细胞、PMVEC细胞、NCIH64细胞
NCIH1694细胞类似产品::GC1-SPG细胞、S3-HeLa细胞、Hs 636 T细胞
U266 B1细胞类似产品::NCIH727细胞、NHA细胞、H920细胞
NCI-H295细胞类似产品::NCIH2141细胞、HUC-1细胞、Keio University-19-19细胞
DLD 1细胞类似产品::PC-3细胞、MCF-12A细胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞
A431/P细胞类似产品::NCIH2135细胞、MCF12F细胞、LMTK-细胞
HEK 293T/17细胞类似产品::SKML-28细胞、FHs 74 Int细胞、BHT-101细胞
CAMA1细胞类似产品::HL-7702细胞、MX-1细胞、2V6.11细胞
SW756细胞类似产品::UCLA-SO-M14细胞、7860细胞、CAL120细胞
LL/2细胞类似产品::MDA-436细胞、TCCPAN2细胞、BEP2D细胞
JEG3细胞类似产品::L428细胞、CCRF-CEM C1细胞、HuO9细胞
KMST-6细胞类似产品::DF-1细胞、TK+/- (clone 3.7.2C)细胞、NCIH441细胞
PE CA PJ34细胞类似产品::H-716细胞、H-2286细胞、U-hth74细胞
Hs852细胞类似产品::FDCP1细胞、OCI-AML4细胞、PC-3M细胞
TM-4细胞类似产品::OAC-P4C细胞、HEC-1-B细胞、CCD966SK细胞
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GA-10 (Clone 4)细胞类似产品::JM细胞、CEM细胞、KMY1022细胞
SW-1088细胞类似产品::CEMO-1细胞、C17细胞、PL45细胞
HEK293细胞类似产品::U-343-MG细胞、HIMEC细胞、Murine Carcinoma-38细胞
MDA-175细胞类似产品::Tn-5细胞、KY180细胞、M4e细胞
MIN-6细胞类似产品::SCC090细胞、DCS细胞、Caov-4细胞
451-LU细胞类似产品::U-138 MG细胞、LY-R细胞、HOP92细胞
C57 Mouse Tumor 64细胞类似产品::BALB/3T3细胞、MDAPCa2b细胞、RT-4细胞
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Ls-174-T细胞类似产品::H87细胞、MC-CAR细胞、RMS13细胞
OP-9细胞类似产品::MADB-106细胞、RERF-LCMS细胞、Y3-Ag1.2.3细胞
THLE-2细胞类似产品::TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞、EBC-1细胞、NPC-TW039细胞
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RCF细胞类似产品::HA细胞、Malme-3 M细胞、MRASMC细胞
SO-RB50细胞类似产品::U118-MG细胞、NP69SV40T细胞、H-660细胞
SUDHL-10细胞类似产品::MDCC-MSB-1细胞、HPAC细胞、MDA-MB415细胞
RKO_AS45细胞类似产品::NCL-H548细胞、X63-Ag8.653细胞、Saos2细胞
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OCI-LY-8细胞类似产品::SKO007细胞、NCI-H2591细胞、HOP-62细胞
MS 751细胞类似产品::OVCA5细胞、BALB 3T3 clone A31细胞、NCI-H520细胞
GM17346细胞类似产品::A-375.S2细胞、Line 697细胞、NCIH2342细胞
SW-982细胞类似产品::LADMAC细胞、C4I细胞、YD-38细胞
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MDA-MB-231-GFP细胞类似产品::EJ细胞、LuCL4细胞、BTI-Tn-5B1-4细胞
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MNNG/HOS Cl #5细胞类似产品::Chinese Hamster Lung细胞、CHP-212细胞、Hs 895 T细胞
SUM-159细胞类似产品::NCI-H1341细胞、HS5细胞、JurkatE6-1细胞
Kit 225 K6细胞类似产品::H-1385细胞、251 MG细胞、VMM5细胞
KU 19-19细胞类似产品::Bovine Turbinate细胞、NCIH2141细胞、Caco-2BBe细胞
RPPVEC细胞类似产品::H209细胞、HCT FET细胞、UACC893细胞
Caco-2 BBe细胞类似产品::RPMI 6666细胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞、Colo-678细胞
K562细胞类似产品::SUM52细胞、LWnt-3A细胞、EO771细胞
H-2342细胞类似产品::HCT116/L细胞、LoVo细胞、H1563细胞
A-2780细胞类似产品::H9c2细胞、SCL-2细胞、BALL1细胞
NU-GC-3细胞类似产品::MGC803细胞、ACCM细胞、MC 116细胞
Sp2/mIL-6细胞类似产品::MDAPCa2b细胞、WM239A细胞、UCLA RO-81-A-1细胞
PC12(高分化)细胞类似产品::Oregon J-111细胞、HO-1-N-1细胞、PC3细胞
C57 Mouse Tumor 64细胞类似产品::BALB/3T3细胞、MDAPCa2b细胞、RT-4细胞
SUNE 1细胞类似产品::Buffalo Rat Liver-3A细胞、SUDHL6细胞、GLAG-66细胞
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MEL细胞类似产品::RS411细胞、QGP1细胞、TE 85 ClF-5细胞
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KU 812F细胞类似产品::RPMI-8226S细胞、MRC-9细胞、HCC1171细胞
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LIPF178C细胞类似产品::NEC8细胞、GM04154细胞、C41细胞
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SK RC 20细胞类似产品::OV1-P细胞、3T3-J2细胞、P3X63Ag8细胞
IMR 90细胞类似产品::SNU-398细胞、SCLC-21H细胞、Sp2/mIL-6细胞
M1细胞类似产品::VM-CUB-1细胞、COLO-320细胞、MDA-MB-435S细胞
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BIC1细胞类似产品::NCI-H1048细胞、TR 146细胞、AHH-1细胞
TALL 1细胞类似产品::Michigan Cancer Foundation-12F细胞、SW837细胞、MPC-5细胞
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MLE 12细胞类似产品::MLA144细胞、MDA MB 453细胞、GM03569细胞
NRK细胞类似产品::DC2.4细胞、Sp2/O-Ag14细胞、NCTC-3960细胞
H1573细胞类似产品::HUT 125细胞、OSK-1细胞、NK-10A细胞
C-Lu65细胞类似产品::MOLP-2细胞、RCC10细胞、NCIH2009细胞
COLO-320-DM细胞类似产品::GEO细胞、KYSE-520细胞、SW1353细胞
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H748细胞类似产品::MJ细胞、H-2009细胞、CAL 27细胞
KYSE30细胞类似产品::MCF7/WT细胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞、HCA7细胞
N9细胞类似产品::KB细胞、KU-812-F细胞、HT144mel细胞
HOCF细胞类似产品::Psi2-DAP细胞、RPMI1788细胞、Clone Y1细胞
YAC-1细胞类似产品::THLE-3细胞、Hu-P-T3细胞、THP 1细胞
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HIT clone T15细胞类似产品::NL20细胞、SVEC4-10细胞、NW-38细胞
BTI-Tn5B14细胞类似产品::Hs 281.T细胞、CNE2细胞、LNCaP-ATCC细胞
U-118MG细胞类似产品::PK-15细胞、293EBNA细胞、HPDEC细胞
SiHa细胞类似产品::SW 620细胞、HCT8细胞、A.704细胞
HuO9细胞类似产品::SW1990细胞、MDA-436细胞、BT.549细胞
COLO206细胞类似产品::NALM-6-M1细胞、H-II-E-C3细胞、SU-DHL-16细胞
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SW-962细胞类似产品::H2126细胞、Jiyoye (P-2003)细胞、CFPAC1细胞
MN-9D细胞类似产品::Mono Mac6细胞、BT549细胞、H-2405细胞
Neuro-2a细胞类似产品::HBSMC细胞、IOSE80细胞、Madin Darby Bovine Kidney细胞
QGY-7701细胞类似产品::CMT 93细胞、CAL 12T细胞、U20S细胞
HCC1008细胞类似产品::HCC1588细胞、REC细胞、SNU-16细胞
A204细胞类似产品::HuT 102细胞、KY-270细胞、TK10细胞
MKN 28细胞类似产品::AG06814-N细胞、RPMI #1846细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞
HepaRG:人肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
CPA 47细胞类似产品::HCC1954-BL细胞、CEM T4细胞、FHL-124细胞
RCK-8细胞类似产品::University of Arizona Cell Culture-893细胞、WC00079细胞、RPMI 7666细胞
NCI-H146细胞类似产品::B16-F10细胞、HCC1143细胞、DLD-1细胞
Kit 225 K6细胞类似产品::H-1385细胞、251 MG细胞、VMM5细胞
KTA-7细胞类似产品::Y3-Ag 1.2.3细胞、Colon-38细胞、HOS细胞
BMDC细胞类似产品::KGN细胞、AHH-1细胞、MDA MB 231细胞
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