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SYBR Green I 核酸胶染料

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-K1004

中文名称：SYBR Green I 核酸胶染料

存储条件：-20°C，1年避光保存

产品活性：MCE SYBR Green I 是一种可代替溴化乙锭（EB）的新型花青类核酸染料，毒性很低，使用安全，最低可以检出 20 pg 的 dsDNA。

生物活性：MCE SYBR Green I 是一种可代替溴化乙锭 (EB) 的新型花青类核酸染料，毒性很低，使用安全。SYBR Green I 最低可以检出 20 pg 的 double-stranded DNA (dsDNA) (254 nm)，灵敏度高于溴化乙锭 (EB) 检测方法。SYBRGreen I 还可以用于检测寡核苷酸，灵敏度同样高于 EB。在采用琼脂糖电泳或聚丙烯酰胺电泳方法检测 dsDNA 时，SYBR Green I 是最灵敏的荧光染料之一。SYBRGreen I 与核酸结合后的最大吸收峰为 490 nm，另外，在紫外区 290 nm 和 380 nm 处也有吸收峰。在紫外透射光下与核酸结合后呈绿色荧光，最大发射波长为 520 nm，可使用可见光凝胶透射系统或紫外凝胶透射系统观测。SYBR Green I 用于电泳检测 DNA 时，既可在电泳前进行染色 (预染染色法)，也可电泳后再进行染色 (后染染色法) • 灵敏度高：低可以检出 20 pg 的 dsDNA • 高信噪比：样品荧光信号强，背景信号低 • 适用性强：适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳；用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色 • 无需去染色或洗涤步骤，与不同检测设备兼容

描述及优势：

MCE SYBR Green I 是一种可代替溴化乙锭 (EB) 的新型花青类核酸染料，毒性很低，使用安全。SYBR Green I 最低可以检出 20 pg 的 double-stranded DNA (dsDNA) (254 nm)，灵敏度高于溴化乙锭 (EB) 检测方法。SYBRGreen I 还可以用于检测寡核苷酸，灵敏度同样高于 EB。在采用琼脂糖电泳或聚丙烯酰胺电泳方法检测 dsDNA 时，SYBR Green I 是最灵敏的荧光染料之一。SYBRGreen I 与核酸结合后的最大吸收峰为 490 nm，另外，在紫外区 290 nm 和 380 nm 处也有吸收峰。在紫外透射光下与核酸结合后呈绿色荧光，最大发射波长为 520 nm，可使用可见光凝胶透射系统或紫外凝胶透射系统观测。SYBR Green I 用于电泳检测 DNA 时，既可在电泳前进行染色 (预染染色法)，也可电泳后再进行染色 (后染染色法)

• 灵敏度高：低可以检出 20 pg 的 dsDNA

• 高信噪比：样品荧光信号强，背景信号低

• 适用性强：适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳；用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色

• 无需去染色或洗涤步骤，与不同检测设备兼容

操作流程：预染染色法 a. 制胶：根据需要配制适当浓度 (0.8-3.0%) 的琼脂糖胶液。在琼脂糖完全融解后，适当冷却但未凝固时，按照每 100 mL 胶液加入 10 μL SYBRGreen I 的比例 (10,000:1) 加入SYBR Green I。混匀后即可把琼脂糖胶液倒入制备凝胶的模具中。 b. 样品、Marker 预染：将 SYBRGreen I 与 6× Loading Buffer 按照 1:9 的比例混合 (如 5 μL 的染料与 45 μL 的 6× Loading Buffer 混合)，获得 Loading Buffer 预染液。将核酸样品和 Marker 分别与 Loading Buffer 预染液按 5:1 的比例混合，室温孵育 3 min 左右。 Note: 含有 SDS 的 Loading Buffer 会影响电泳结果，建议使用不含 SDS 的 Loading Buffer。由于SYBR Green I 灵敏度高，核酸样品量较大时可能会使条带分不清，所以建议品质较好的 Marker 和浓度较高的样品可以适当稀释后使用 (一般 2 μL 配制好的 Loading Buffer 预染液对 DNA 的有效承载量为 100-500 ng)。 c. 按常规方法上样电泳，电泳结束后即可在紫外或蓝光照射下观察。 后染染色法 a. 按照常规方法进行电泳，不需要在制胶时加 SYBR Green I。 b. 用 pH 7.5-8.0 的缓冲液 (例如 TAE、TBE 或 TE)，按照一定比例稀释 SYBR Green I (琼脂糖凝胶电泳按 1:10,000 或 2:10,000 的比例稀释；聚丙烯凝胶电泳按 3:10,000 或 4:10,000 的比例稀释)，轻轻震荡混匀，即成染色液。染色液一周内，避光低温储存应至少可用 4 次。 c. 将凝胶完全浸入染色液中，室温避光震荡染色 30-60 min。染色时间根据胶浓度及厚度确定，凝胶越厚或浓度越高，所需的染色时间越长。 d. 染色结束后即可直接在紫外或蓝光照射下观察。

详情参考：www.medchemexpress.cn/inhibitor-kit/sybr-green-i-nucleic-acid-gel-stain.html