aladdin 阿拉丁 S171397 SYBR Green I凝胶染色溶液 163795-75-3 10000 x in DMSO

中文名：SYBR Green I凝胶染色溶液

英文名：SYBR Green I Gel Staining Solution, 10000x

纯度：10000 x in DMSO

货号：S171397

Cas号：163795-75-3

存储温度：-20°C储存,充氩

运输条件：超低温运输

产品介绍：

SYBR Green I是一种特制的不对称花菁染料，用于检测核酸。这种成分由N-烷基化苯并噻唑或苯并噁唑环系统组成，通过单次甲基桥连接吡啶鎓或喹啉鎓环系统。

核酸染料特点： 

1. 相对安全：花菁染料，实验显示在凝胶染⾊浓度下⽆致突变性，可以代替致癌物溴化⼄锭EB作为各种核酸电泳的染⾊剂。 

2. ⾼灵敏：紫外凝胶透射仪下灵敏度⾼ EB 染⾊法 5-10 倍，可⻅光透射仪下的灵敏度⽐ EB 染⾊法⾼20~30 倍。 

3. 信噪⽐⾼：样品荧光信号强，⽆背景信号。 

4. 操作简单：⽆须脱⾊或冲洗，即可⽤紫外凝胶透射仪观察或可⻅光透射仪观察。 

5. 适⽤范围⼴：可适⽤于多种电泳分析，如琼脂糖凝胶电泳和 PAGE 凝胶电泳。

6. 使⽤⽅便：不影响其它修饰酶作⽤(如：Taq 酶、内切酶、T4 连接酶、反转录酶等)。

核酸染料使用方法： 

1.胶染法(用法同EB)(推荐方法，见图1) 1) 制胶时加⼊ Sybr Green I 核酸染料。冷却胶到 50℃左右，每 100ml 胶中加⼊1-3µl Sybr Green I 核酸染料（⻅图 1）。 

2) 按照常规⽅法进⾏电泳即可。 

3) ⽤紫外凝胶透射仪或可⻅光透射仪观测。蓝光可透过玻璃， 观测聚丙烯酰胺凝胶时，可直接将托有凝胶的玻璃平⽫放⼊可⻅光透射仪内观测。 *注：此⽅法染⾊能准确确定⽚段分⼦量且⽤量较少。1ml 染料可以做 1000 块10 ml 胶，每块胶点 50 个样，可做 50000 次。 

2.点染法(见图3) 

1) 该⽅法适于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳。 

2) ⼯作液的配制：⽤电泳缓冲液将10000×的Sybr Green I 稀释100倍，即为Sybr Green I ⼯作液。Sybr Green I ⼯作液可以置2～8℃保存⼀个 ⽉以上, 浓缩液在-20℃保存半年。 

3) 制胶：按常规⽅法制胶，不含任何染料。

4) 样品染⾊：向分析样品中加⼊Sybr Green I⼯作液和载样缓冲液，室温放置10分钟，使Sybr Green I与样品中DNA充分结合。Sybr Green I ⼯ 作液加⼊量为总上样量的1/5～1/10。 

5) DNA Marker染⾊：将5μL DNA Marker、5μL DNA Marker稀释液和1μLSybr Green I ⼯作液混匀，室温放置5分钟，使Sybr Green I 与DNA 充分结合。 

6) 上样、电泳：按常规操作。⽤紫外凝胶透射仪或可⻅光透射仪观测。蓝光可透过玻璃， 观测聚丙烯酰胺凝胶时，可直接将托有凝胶的玻璃平 ⽫放⼊可⻅光透射仪内观测。 *注：⽤点染法染⾊时，灵敏度最⾼，染料⽤量最少。通常点⼀个样加⼊ 1µL 即 可，可以使⽤ 10000 次, 但⼤⽚段稍有滞后现象，如果需要更准 确确定分⼦量(与 Marker 对⽐)，建议使⽤胶染法。 

3.泡染法 

1) 按照常规⽅法进⾏制胶，其中不含任何染料。 

2) ⽤ pH 7.0 - 8.5 的缓冲液(如：TAE, TBE)，按照 1﹕1000 的⽐例稀释 Sybr Green I 

3) 核酸染料，混匀，制成染⾊溶液。 

4) 将染⾊溶液倒⼊合适的聚丙烯容器中，放⼊凝胶，⽤铝箔等盖住容器使染料避光。 室温振荡染⾊ 10-30 分钟，染⾊时间因凝胶浓度和厚度⽽ 定。聚丙烯酰胺凝胶直 接在玻璃平⽫上染⾊，将配好的稀释溶液轻轻地倒在胶板上，让稀释液均匀地覆 盖整个胶板，并染⾊ 30 分钟。玻璃 平⽫必须预先经过硅烷化溶液处理（避免染料 吸附在玻璃表⾯上）。 

5) ⽤紫外凝胶透射仪或可⻅光透射仪观测。蓝光可透过玻璃， 观测聚丙烯酰胺凝胶时，可直接将托有凝胶的玻璃平⽫放⼊可⻅光透射仪内观测。 *注：⽤泡染⽅法染⾊时，可以精确确定核酸⽚段分⼦量。但染料⽤量是三种⽅法中⽤量最⼤的。 本品⽤ DMSO 溶解，因为 DMSO 溶点是 18.3℃，使⽤前请放置到室温充分溶解。  

核酸染料使用注意事项： 

1. Sybr Green核酸染料样品点染⽅法中，电泳不要超过 2 ⼩时，以免核酸染料从 DNA/RNA 上分离出来，产⽣弥散状条带。 

2. ⽤点染⽅法染⾊时，条带稍有滞后现象，如果需要确定⽚段精确分⼦量（和 Marker 对⽐），建议⽤胶染法和泡染法。 

3. 常规⽤酒精沉淀核酸过程中，Sybr Green I 核酸染料可以全部从核酸上去掉。 

4. DNA电泳请选择 Sybr Green I 染料，RNA 电泳请选择 Sybr Green II染料，两种染料不通⽤。 

5. Sybr Green I 核酸染料对玻璃和⾮聚丙烯材料具有⼀定亲合⼒。建议在稀释、贮存、染 ⾊等使⽤过程中⽤聚丙烯类容器。 

6. 可以加Orange Red 作为标记. pH值在7.5-8.3之间,不要微波加热,加⼊热胶的温度低于50度。

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