小鼠Thioredoxin-1elisa试剂盒 新品

小鼠Thioredoxin-1elisa试剂盒

产品简介:

检测原理

采用双抗体夹心法，微孔板预包被抗硫氧还蛋白-1抗体，加入标准品和样本后，与生物素标记的检测抗体结合，再加入HRP标记的链霉亲和素，催化底物TMB显色，颜色深浅与硫氧还蛋白-1浓度正相关。

检测范围通常为31.25-1000 pg/mL。

试剂盒组成

预包被抗体的酶标板

标准品

生物素标记的检测抗体

HRP标记的链霉亲和素

显色底物（TMB）

终止液

洗涤液

样本稀释液

操作步骤

加入标准品和样本至微孔板，孵育后洗涤。

加入生物素标记的检测抗体，孵育后洗涤。

加入HRP标记的链霉亲和素，孵育后洗涤。

加入底物溶液，显色后加入终止液。

酶标仪测定吸光度，计算硫氧还蛋白-1浓度。

保存条件

试剂盒应储存在2-8℃，未开封试剂盒的有效期一般为6个月。

注意事项

实验中需使用一次性吸头，避免交叉污染。

试剂需按说明书保存，避免冻结和反复冻融。

洗涤步骤要彻底，避免残留液体影响结果。

显色时间需控制，避免过度显色影响读数准确性。

注意事项

严格按照说明书操作，避免交叉污染和非特异性结合。

样本避免反复冻融，未用完的板条密封冷藏（2-8℃）保存。

试剂盒组分不可混用，标准品建议一次性使用。

血浆、血清及组织样本需规范处理，避免溶血和杂质干扰。

该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点，是兔MIP-3α/CCL20定量检测及相关疾病机制研究的可靠工具，广泛应用于兔免疫、炎症、感染等领域的科研。

常见问题解答 (FAQ)

Q1: 为什么要做“复孔”？

A: 建议每个样本（包括标准品）都做复孔（2-3个孔）。这样可以计算平均值，减少操作误差，提高数据的可信度。

Q2: 样本需要稀释吗？

A: 是的。如果样本浓度过高，超出了标准曲线的检测范围，需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时，记得乘以稀释倍数。

Q3: 结果出现“花板”（背景不均）怎么办？

A: 可能原因包括：洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂（如底物）受光照分解。请检查洗板机是否堵塞，确保温育箱温度恒定。

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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。