大鼠Thioredoxin-1elisa试剂盒

                                             大鼠Thioredoxin-1elisa试剂盒
一、核心检测信息

检测目标

特异性定量大鼠血清、血浆、组织匀浆（如肝脏、心脏）或细胞裂解液中的 Trx-1，一种调控氧化还原平衡的关键蛋白，通过其活性位点Cys-Gly-Pro-Cys参与抗氧化防御、炎症调控和细胞凋亡抑制。

检测原理

双抗体夹心ELISA：

预包被抗大鼠Trx-1抗体（靶向活性中心结构域）捕获目标蛋白 → 生物素标记二抗结合 → HRP-链霉亲和素-TMB显色系统（450nm主波长/630nm参比波长读数）。

 二、试剂盒核心参数

关键指标  技术说明

检测范围  0.1-20 ng/mL（6梯度点）

最低检测限  0.03 ng/mL（超高灵敏度）

样本兼容性  血清（避免溶血）、心肌组织裂解液（含1% NP-40）、细胞胞浆提取物

特异性验证  不与大鼠Trx-2、Grx1交叉

批内/批间CV  ＜5%/＜8%

三、典型应用场景

氧化应激研究

缺血再灌注损伤或糖尿病模型中Trx-1对ROS（活性氧）的清除作用分析

心血管疾病

动脉粥样硬化斑块中Trx-1与NF-κB通路的相互作用

肿瘤生物学

Trx-1在化疗耐药肿瘤细胞中的过表达机制

四、操作关键要点

样本处理

氧化应激样本：需在采集后立即加入10mM N-乙基马来酰亚胺（NEM）阻断游离巯基

胞浆提取物：建议使用含0.1% DTT的裂解液（防止Trx-1二聚化）

实验优化

高浓度样本建议1:10稀释（使用含5% BSA的PBS）

显色时间严格控制在10分钟（室温25℃±1℃）

五、注意事项

干扰因素

高浓度DTT（＞1mM）会干扰抗体结合，需透析去除

数据解读

建议联合检测Trx还原酶（TrxR）活性以评估Trx系统功能状态

保存条件

未开封试剂盒4℃避光保存（有效期12个月），标准品-80℃分装（冻融≤2次）

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