兔Thioredoxin-1elisa试剂盒 新品

产品介绍：

兔Thioredoxin-1（Trx1）ELISA试剂盒是一种用于定量检测兔样本中硫氧还蛋白-1（Thioredoxin-1）含量的试剂盒，采用双抗体夹心法原理，适用于血清、血浆、细胞培养上清液及其他生物体液中的Trx1检测。该方法具有高灵敏度和强特异性，能够有效保障实验结果的准确性。

产品特点

检测原理：使用抗兔Trx1单抗包被酶标板，样本中的Trx1与单抗结合后，加入生物素化的抗兔检测抗体和HRP标记的亲和素，通过底物显色实现定量分析。

灵敏度高、特异性强：试剂盒经过优化，可减少误差并保证数据的可重复性。

操作注意事项：

加酶试剂后需用吸水纸轻拭酶标板表面，避免残留酶影响结果；

洗涤时各孔需加满液体，防止游离酶未洗净；

使用量程接近所需量的微量加样器，提高加样准确性。

应用范围

主要用于科研领域，涉及肿瘤、代谢、抗氧化应激、细胞调控等方向。Trx1作为氧化还原酶，可通过还原其他蛋白质的半胱氨酸残基发挥抗氧化作用，同时参与调节转录因子和受体的活性，其表达水平与多种疾病相关。

保存与使用

试剂盒通常需保存在2-8°C冷藏环境，避免反复冻融，有效期一般为6个月至1年，具体依厂家说明而定。

使用前应仔细阅读说明书，确保操作规范，以获得可靠结果。

检测原理

采用双抗体夹心法，预先包被抗Trx1抗体的酶标板中加入标准品和待测样本，孵育后洗去未结合成分。

加入生物素标记的检测抗体，与结合在包被抗体上的Trx1结合，再加入HRP标记的链霉亲和素。

加入TMB底物液显色，酸终止反应后，用酶标仪在450nm波长测OD值，通过标准曲线计算样本中Trx1浓度。

试剂盒组成

酶标包被板：12孔×8条

标准品：0.3mL×6管（浓度依次为320、160、80、40、20、0ng/L）

20倍浓缩洗涤液：25mL

生物素：1mL

酶标试剂：10mL

显色剂A液和B液：各6mL

终止液：6mL

封板膜：2张

说明书：1份

检测步骤

准备试剂和样本：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。

设置加样孔：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置。

加标准品和样本：标准品孔中加入标准品50μL；空白对照孔不加。待测样本孔中先加入生物素10μL，再加待测样本50μL。

加酶标工作液：每孔加入酶标工作液100μL；空白对照孔不加。

温育：37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

洗涤：弃去液体，用洗涤液洗涤5-6次，拍干。

加底物液：每孔加入底物液A、B各50μL，避光温育15-30分钟。

加终止液：每孔加入终止液50μL，终止反应。

测定：使用酶标仪在450nm波长下测定各孔的OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中Trx1的含量。

注意事项

样本处理：确保样本清澈透明，避免溶血和反复冻融。

试剂保存：试剂盒储存在2-8℃，避免冻结，使用前检查试剂是否充分溶解。

实验操作：严格按照说明书操作，使用前混匀试剂，避免交叉污染。

底物液保存：底物液需避光保存，显色时间控制在30分钟内。

适用范围

本试剂盒专用于科研领域，不适用于临床诊断。

可检测兔血清、血浆、细胞培养上清液等样本。

主要优点缺点

维度  优势 (Pros) 劣势 (Cons)

检测性能   灵敏度极高，特异性强，结果准确  可能存在交叉反应，易受干扰物影响

操作体验   流程标准化，无需昂贵设备，适合高通量检测   步骤多且繁琐，耗时较长，对操作技巧有要求

经济成本   适合大批量样本检测，长期看性价比尚可   单次试剂成本较高，且不同批次可能存在差异

应用范围   可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本   对样本质量（如是否溶血）敏感

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试剂与样本准备阶段

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。