病毒总提取试剂盒（吸附柱法）

商品属性：

产品概述

适用范围：从血清、血浆、细胞培养上清液、粪便、环境样本等中提取病毒总核酸（DNA/RNA），兼容包膜/无包膜病毒（如流感病毒、轮状病毒、腺病毒等）。

方法原理：基于硅胶膜吸附柱技术，通过裂解液释放核酸，在高盐条件下结合硅胶膜，经洗涤后低盐洗脱，获得高纯度核酸。

适配检测：适用于qPCR、测序、微阵列分析等下游实验。

2. 操作流程

样本预处理

液体样本（如血清）：直接取200 μL，加入裂解液。

固体样本（如粪便）：需匀浆后离心取上清。

含蛋白样本：可先蛋白酶K消化（56℃ 15min）。

裂解结合

加入裂解液（含胍盐和去污剂），震荡混匀，破坏病毒衣壳释放核酸。

吸附纯化

转移至吸附柱，离心使核酸结合硅胶膜（高盐条件下）。

洗涤

用70%乙醇洗涤2次，去除蛋白质、多糖等杂质。

洗脱

加无核酸酶水（或TE缓冲液）洗脱，获得纯净核酸。

3. 关键性能参数

指标  参数要求

得率  ≥90%（10^6病毒颗粒样本）

纯度  A260/A280=1.8-2.0（DNA/RNA）

灵敏度  可检测≤50 copies/mL样本

处理时间  20分钟/样本（96孔板兼容）

4. 注意事项

抑制物残留：

粪便样本需额外加入抑制剂去除试剂（如PVPP）。

洗脱液体积建议≤50 μL以提高浓度。

样本保存：

短期（1周）可4℃保存，长期需-80℃（避免反复冻融）。

质控建议：

每批次设置阴性对照（无核酸水）和阳性对照（已知病毒样本）。

5. 常见问题

Q：能否同步提取宿主DNA/RNA？

A：需优化裂解条件（如加入DNase/RNase选择性去除宿主核酸）。

Q：与磁珠法相比的优劣？

A：吸附柱法成本低、操作简单，但通量较低；磁珠法更适合自动化高通量提取。

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