肠道病毒 71 型检测试剂盒 新品

商品属性：

检测目标：特异性检测肠道病毒71型（EV71），该病毒是手足口病（HFMD）的主要病原体，与重症神经系统并发症（如脑干脑炎）密切相关。

方法原理：基于荧光定量PCR（qPCR），靶向EV71的VP1基因（血清型特异性区），通过FAM通道检测，搭配内参基因（如β-actin，HEX通道）监控样本质量。

适用样本：咽拭子（首选）、疱疹液、粪便、脑脊液（重症病例）。

检测流程

样本处理

咽拭子/疱疹液：置于病毒保存液（如UTM）中震荡洗脱，离心取上清。

粪便：10%悬液制备，过滤去除颗粒物。

核酸提取

推荐磁珠法提取RNA（如Qiagen RNeasy Mini Kit），避免RNA酶降解。

PCR扩增

反应体系（示例）：

引物探针：VP1-F/R（FAM），内参（HEX）。

循环程序：50℃ 15min（逆转录）→ 95℃ 3min →（95℃ 15s → 60℃ 45s）×45循环。

结果判读

阳性：Ct≤35（FAM），且内参Ct≤30。

可疑：35<Ct<38，建议复测或测序验证。

3. 性能参数

指标  参数要求

灵敏度  ≤100 copies/反应

特异性  不与柯萨奇病毒A16（CV-A16）交叉

检出限  95%检出率（10^3 copies/mL）

重复性  批内/批间Ct值差异≤1.5

4. 注意事项

假阴性控制：

EV71 RNA易降解，样本需-80℃保存（短期可-20℃）。

重症病例脑脊液病毒载量低，建议浓缩后检测。

生物安全：EV71属BSL-2病原体，操作需在生物安全柜中进行。

质控要求：每批次含阴性对照（无核酸水）、阳性对照（含VP1基因质粒）。

5. 应用场景

临床诊断：

手足口病患儿病原分型（EV71 vs. CV-A16）。

重症病例（如脑炎）的早期预警。

疫情防控：托幼机构聚集性疫情病原追踪。

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