肠道腺病毒检测试剂盒

商品属性：

检测目标：特异性检测肠道腺病毒（HAdV-F组，血清型40/41），主要引起婴幼儿急性胃肠炎，占病毒性腹泻病例的5%-20%。

方法原理：基于荧光定量PCR（qPCR），靶向腺病毒六邻体蛋白基因（hexon）或纤维蛋白基因（fiber），通过FAM/VIC双通道区分血清型40/41。

适用样本：粪便（首选）、肛拭子、呕吐物（需预处理）。

2. 检测流程

样本处理

粪便样本：取0.1 g加1 mL PBS匀浆，离心取上清（避免纤维残渣）。

肛拭子：置于病毒保存液（如UTM）中震荡洗脱。

核酸提取

推荐磁珠法（如Qiagen QIAamp Viral RNA Mini Kit），提取DNA/RNA（腺病毒为双链DNA病毒）。

PCR扩增

反应体系：

引物探针：靶向hexon基因（FAM），内参（如RNase P，VIC）。

循环程序：95℃ 3min →（95℃ 15s → 60℃ 45s）×45循环。

结果判读

阳性：Ct≤35（FAM通道），且内参Ct≤30。

阴性：无扩增曲线或Ct≥38。

3. 性能参数

指标  参数要求

灵敏度  ≤50 copies/反应

特异性  不与轮状病毒、诺如病毒交叉

检出限  95%检出率（10^2 copies/g粪便）

抗干扰性  耐受10%胆汁或血红蛋白

4. 注意事项

假阴性控制：

粪便中可能存在PCR抑制物，需设置内参监控。

腺病毒易降解，样本需-80℃保存（短期可-20℃）。

生物安全：操作需在BSL-2实验室进行，避免气溶胶污染。

质控要求：每批次含阴性对照（无核酸水）、阳性对照（含腺病毒质粒）。

5. 应用场景

临床诊断：婴幼儿水样腹泻病原筛查（尤其冬季高发期）。

托幼机构防控：聚集性腹泻事件快速排查。

流行病学研究：腺病毒血清型分布监测。

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