超级细菌(SB)NDM-1检测试剂盒（荧光PCR法） 新品

超级细菌(SB)NDM-1检测试剂盒（荧光PCR法）

试剂简介：

检测目标：特异性检测迟缓爱德华氏菌（Edwardsiella tarda），一种常见的水产病原体，可感染鱼类（如鳗鲡、罗非鱼）及人类（引致胃肠炎或败血症）。

 方法原理：基于恒温荧光扩增技术（如LAMP或RPA），通过特异性引物在恒定温度（通常60-65℃）下扩增靶基因（如esrB或gadB），结合荧光染料或探针实时检测信号。

适用样本：鱼类组织（肝、肾）、水体、粪便、临床伤口拭子等。

2. 检测流程

样本处理

组织样本：匀浆后离心取上清，或直接裂解释放DNA。

水体样本：过滤浓缩或增菌培养（如TSB培养基，28℃ 18-24h）。

核酸提取

快速提取法（如煮沸法或试剂盒提取），需避免多糖/蛋白质污染。

恒温扩增

反应体系：含DNA聚合酶（如Bst）、dNTPs、荧光染料（如SYTO 9）、特异性引物。

反应条件：60-65℃恒温反应20-40分钟，荧光信号实时监测。

结果判读

阳性：荧光信号超过阈值且呈指数增长。

阴性：无显著荧光升高（需排除抑制物干扰）。

3. 性能参数

指标  参数要求

灵敏度  ≤100 CFU/mL（纯培养）

特异性  不与近源菌（如E. ictaluri）交叉

检出限  95%概率检出5×10^2 CFU/g（组织）

抗干扰性  耐受10%鱼体黏液或腐殖酸

4. 注意事项

假阳性风险：避免气溶胶污染，建议分区操作（核酸提取/扩增分离）。

温度控制：恒温设备需校准，温度波动≤1℃。

质控设置：每批次需包含阴性对照（PBS）和阳性对照（含靶序列质粒）。

5. 应用场景

水产养殖：快速诊断鱼类爱德华氏菌病（如“鳗鲡红头病”）。

食品安全：进出口水产品检疫。

环境监测：养殖水体病原筛查。

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