鲤鱼上皮细胞/胖头鲦鱼上皮细胞；EPC

产品信息：

来源与背景

源自鲤鱼（Cyprinus carpio）皮肤上皮瘤组织，属鱼类上皮细胞系。

关键特征：

对多种水生病毒敏感（如鲤春病毒血症病毒SVCV、传染性造血器官坏死病毒IHNV）。

可用于鱼类病毒学、环境毒理学及细胞永生化机制研究。

应用领域：水生病毒检测、疫苗开发、重金属毒性评估。

形态与生长特性

形态：上皮细胞样（铺路石状），细胞悬浮后平均直径约11.19 μm。

生长方式：贴壁生长，汇合度达80%–90%时需传代。

培养条件：25–30℃（无需CO?环境），部分文献建议37℃。

培养操作流程

培养基与试剂

基础培养基：

推荐：L-15培养基（Leibovitz's-15）或MEM培养基。

添加成分：

10%–20%胎牛血清（FBS）

1%青霉素-链霉素（P/S）。

消化液：0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA。

冻存液：90% FBS + 10% DMSO 或专用无血清冻存液。

传代培养（贴壁细胞）

消化监控：

弃旧培养基，PBS洗涤1次，加入胰酶（T25瓶1–2 mL），25–30℃消化1–2分钟。

镜下观察细胞变圆脱落即终止消化。

终止与离心：

加入2倍体积完全培养基终止消化，吹打均匀后1000 rpm离心5分钟。

重悬与分瓶：

按 1:2至1:5比例 分瓶，补充新鲜培养基至T25瓶6–8 mL。

冻存与复苏

冻存：

细胞状态良好时冻存，密度5×10?–1×10? cells/mL，程序性降温（-80℃过夜→液氮）。

复苏：

37℃水浴快速解冻，稀释后离心重悬，接种后次日换液。

三、关键注意事项

温度敏感性

严格维持25–30℃（部分文献建议37℃），高于30℃可能导致细胞损伤。

污染防控

支原体、细菌、真菌检测为阴性（供应商质控）。

收货后立即拍照记录（40×, 100×, 200×），作为售后依据。

特殊处理

贴壁弱细胞：运输中易脱落，需离心收集上清液，胰酶轻柔消化。

空泡现象：密集培养时细胞内可见巨大空泡，属正常特性。

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细胞类型与特性

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。