人乳腺癌细胞；mda-mb-231+GFP+LUC 新品

                                                           人乳腺癌细胞；mda-mb-231+GFP+LUC
产品信息：

人乳腺癌细胞MDA-MB-231是一种广泛研究的三阴性乳腺癌细胞系，而MDA-MB-231+GFP+Luc则是经过基因工程改造的衍生细胞系，同时表达了绿色荧光蛋白（GFP）和荧光素酶（Luciferase）。这种改造使得细胞在活体成像和细胞追踪研究中具有重要应用价值。以下是其详细说明、培养操作和特性的表格总结：

细胞来源与特性   MDA-MB-231细胞源自一名51岁白人女性乳腺癌患者的胸腔积液，属于三阴性乳腺癌（TNBC）细胞系，即雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）和人表皮生长因子受体2（HER2）均为阴性。

细胞呈上皮样形态，贴壁生长。

MDA-MB-231+GFP+Luc细胞系在此基础上通过基因工程稳定表达了GFP和Luciferase，分别用于细胞可视化和生物发光成像。

培养基   Leibovitz's L-15培养基或DMEM，添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素-链霉素（PS）。

培养条件   37℃、空气环境（不需CO）；若使用DMEM培养基，则需5% CO环境。

传代方法   细胞密度达80%-90%时进行传代。

使用0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA消化1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆脱落即终止消化。

离心收集细胞，按1:2至1:4比例分瓶传代。

冻存与复苏   冻存液为90%FBS+10%DMSO，程序降温后液氮保存。

复苏时37℃水浴快速解冻，加入完全培养基稀释DMSO，离心后重悬接种。

应用领域   肿瘤转移机制研究：利用GFP和Luc进行活体成像，追踪肿瘤细胞的迁移和转移过程。

药物筛选与疗效评估：通过生物发光成像实时监测药物对肿瘤生长的抑制效果。

分子信号通路研究：探究乳腺癌相关信号通路的调控机制。

MDA-MB-231+GFP+Luc细胞系因其独特的标记特性，在乳腺癌研究中具有广泛的应用前景。在培养过程中，需特别注意其对培养环境（如CO浓度）的特殊要求，并严格遵循无菌操作规范，以确保细胞的正常生长和实验结果的可靠性。

培养操作要点：

细胞培养

是指在体外模拟体内环境（无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件），使细胞生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的技术。

根据细胞种类和生长方式，培养操作和特性各有不同。

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

基本操作步骤：

原代培养：取材→分离→培养，需保持材料新鲜及严格无菌。

传代培养：贴壁细胞需胰酶消化，悬浮细胞可直接传代，离心后重悬分瓶。

冻存与复苏：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻。

具体特点如下：：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。

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