游离脂肪酸含量(FFA)测定试剂盒/微量法测血清/动物组织/微生物/细胞/96样 新品

游离脂肪酸含量(FFA)测定试剂盒/微量法测血清/动物组织/微生物/细胞/96样

测定意义：

游离脂肪酸，也称为非酯化脂肪酸，在与白蛋白结合的血浆中循环。动物血液中的游离脂肪酸 (FFA )含量是一项重要的生理生化指标。血清中游离脂肪酸的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关，游离脂肪酸的浓度会因为糖尿病、重症肝障碍、甲状腺功能亢进等疾病而上升。

测定原理：

用有机溶剂萃取 FFA 。含有 FFA 的有机液与三乙醇胺铜反应,在有机相中形成脂肪酸铜 (铜皂) FFA 一 Cu。 Cu 离子与显色液反应形成紫红色络合物。反应形成的颜色深浅与 Cu 离子浓度的关系符合朗伯一比尔定律，因此可利用此反应进行比色。

自备仪器和用品：

酶标仪、离心机、可调式移液器、96 孔板、蒸馏水。

测定操作：

1 、酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 550 nm。

2 、工作液的配制： 临用前根据用量按照试剂一（V） ：试剂二（V） ：试剂三（ m ）=1（mL） ：1（mL）：0.66（g）的比例充分混匀。（注意：现用现配，用多少配多少，在空瓶中配制，试剂盒中带有 4 个空瓶，先将试剂一与试剂二混合，最后再加入试剂三粉剂）。

3、测定管：吸取600μL样本，加入200μL工作液，盖紧后震荡20min ，4℃, 5000 rpm离心5min，分层后取200μL上层有机相，加入100μL试剂四，摇匀，10 min后测定550 nm的吸光值，记为A测定。

4 、空白管：吸取600μL萃取液，加入200μL工作液，盖紧后震荡20min ，4℃, 5000 rpm离心5min，分层后取200μL上层有机相，加入100μL试剂四，摇匀，10 min后测定550 nm的吸光值，记为A空白。空白管只需测一次。△A=A测定-A空白。

注 意：

1、有机溶剂易挥发，加入96孔板后应尽快检测。

2、测定管中加入的样本即样本前处理中的有机相待测液。