人非小细胞肺癌细胞；NCI-H1734 (STR)

                                                           人非小细胞肺癌细胞；NCI-H1734 (STR)
产品信息：

NCI-H1734是一种人非小细胞肺癌（NSCLC）细胞系，常用于肺癌研究，特别是与K-Ras突变相关的机制研究和药物筛选。

细胞特性：

来源与背景：NCI-H1734细胞系来源于一位非吸烟女性患者的非小细胞肺癌组织。该细胞系具有K-Ras突变和EGFR野生型特征，常用于研究非小细胞肺癌的发生机制、转移机制及K-Ras靶向治疗。

形态特征：细胞呈上皮细胞样形态，贴壁生长。

分子特征：携带K-Ras突变，EGFR野生型，适用于研究Ras信号通路及相关靶向治疗。

培养条件：

培养基：通常使用RPMI-1640培养基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素-链霉素（双抗）。

培养环境：37℃，5% CO₂，饱和湿度培养箱。

传代比例：1:2至1:4，当细胞密度达到80%-90%时进行传代。

冻存条件：使用无血清冻存液或90% FBS+10% DMSO，液氮或-80℃保存。

培养操作步骤：

细胞复苏：

从液氮中取出冻存管，迅速放入37℃水浴中解冻。

将细胞悬液转移到含有5-6mL完全培养基的离心管中，1000 rpm离心5分钟，弃去上清液。

用新鲜培养基重悬细胞，接种至T25培养瓶，37℃、5% CO₂培养箱中培养，第二天换液。

细胞传代：

弃去旧培养基，用PBS润洗细胞1-2次。

加入胰酶-EDTA溶液消化1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆并脱落，加入完全培养基终止消化。

轻轻吹打细胞，使之完全脱落，离心后重悬，按1:2至1:4比例分瓶，补充新鲜培养基继续培养。

细胞冻存：

收集对数生长期的细胞，离心后弃上清，用冻存液重悬细胞。

分装至冻存管，先置于-20℃ 1.5小时，然后移至-80℃过夜，24小时后转入液氮罐长期保存。

注意事项：

细胞状态监控：定期观察细胞形态和生长状态，及时处理污染或异常情况。

消化控制：胰酶消化时间需严格控制，避免过度消化导致细胞损伤。

细胞类型与特性：

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。

特殊细胞的生物特性举例：

成纤维细胞：具丰富粗面内质网、高尔基体，能合成胶原纤维、弹性纤维及有机基质；在外伤刺激下可恢复幼稚状态，参与组织修复。

肿瘤细胞：具无限增殖、贴壁依赖或悬浮生长、易转化等特性，常用于药物筛选与癌变机制研究。

神经干细胞：具多向分化潜能（可分化为神经元、星形胶质细胞等），增殖能力强，在体外培养中可形成克隆球。

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注意事项与应用：

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。