L02; LO2; HL-7702; HL7702（人正常肝细胞）

产品信息：

L02、LO2、HL-7702和HL7702均指同一种细胞系，即人正常肝细胞系，常用于肝细胞相关研究。该细胞系具有典型的肝细胞形态学特征，可用于多种实验研究，如药物代谢、毒理学研究、肝细胞功能研究等。

细胞特性：

来源：L-02（亦称HL-7702）细胞系最初是于1980年鉴定建立的，最初被认为源自正常的胎儿肝组织，后经STR鉴定发现被HeLa细胞污染，现被认为是HeLa衍生物。

形态：上皮细胞样，贴壁生长。

生长特性：贴壁生长，群体倍增时间约为20小时。

分子标志物：AFP与CK-19表达阴性，ALB表达在10μg/ml水平，部分细胞多次传代后可能发生形态变异，ALB表达缺失。

培养操作：

培养基：RPMI-1640培养基 + 10%胎牛血清（FBS） + 1%青霉素/链霉素溶液。

培养条件：37℃、5% CO₂、饱和湿度环境。

传代比例：建议1:2至1:4传代，根据细胞密度调整。

冻存条件：使用90%胎牛血清和10%DMSO作为冻存液，程序降温后存于液氮或-80℃冰箱。

复苏与传代步骤：

复苏细胞：

将冻存管在37℃水浴中迅速解冻。

加入预热的完全培养基，离心（1000RPM，3-5分钟）。

弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，接种至T25培养瓶中，37℃培养箱培养。

传代培养：

当细胞密度达到80%-90%时，弃去旧培养基，用PBS润洗细胞1-2次。

加入胰酶-EDTA溶液消化细胞，显微镜下观察细胞变圆并脱落时，加入含血清的培养基终止消化。

离心后重悬细胞，按1:2至1:4比例分瓶继续培养。

注意事项：

定期检测支原体污染，确保细胞培养的纯净。

由于该细胞系可能被HeLa细胞污染，建议在使用前进行STR鉴定以确认细胞身份。

确保培养箱和操作环境的无菌，避免细胞污染。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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 功能特点

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运；以ATP为核心载体，通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能；通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导；原核细胞采用二分裂，真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖；细胞可进行程序性死亡（凋亡），并在多细胞生物中实现分化形成不同组织

注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。