NCI-H28细胞

                                                           NCI-H28细胞
产品信息：

NCI-H28细胞是一种人恶性间皮瘤细胞系，具有贴壁生长特性，形态呈上皮细胞样，常用于间皮瘤研究及抗癌药物筛选。

细胞基本特性

来源与形态：NCI-H28细胞来源于人恶性间皮瘤组织，贴壁生长，形态呈上皮细胞样。

生长特性：细胞密度达80%-90%时即可进行传代培养，倍增时间约24-36小时；可长期传代维持，理论无限传代能力。

培养条件与操作步骤

基础培养基：推荐使用RPMI-1640或DMEM（高糖）培养基，添加10%胎牛血清（FBS）及1%双抗（青霉素/链霉素），培养环境为37℃、5% CO₂及95%空气，湿度维持70%-80%。

复苏操作：将含1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀，1000rpm离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜，次日换液并检查细胞密度。

传代操作：贴壁细胞：弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。加1-2mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6ml培养液的新皿中或者瓶中。

冻存操作：待细胞生长状态良好时，弃培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，进行离心收集，1000RPM条件下离心8-10分钟，去除上清，按冻存数量加入到冻存液中。

注意事项与售后条款

运输处理：收到细胞后用75%酒精消毒瓶身，超净台内静置2-4小时；若培养瓶盖未松开需拧松；镜下检查污染及脱落细胞，运输中脱落的活细胞可离心富集后传代。

污染防控：严格无菌操作，若培养基浑浊或瓶身破损需立即联系供应商；售后条款包括：污染问题需在48小时内提交台盼蓝染色结果，核实后重发；干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后或常温发货的细胞静置4小时候并且未开封，出现污染，重发。

使用限制：细胞仅用于科研，未经许可不得转让第三方；首次传代建议1:2分瓶，2-3天换液一次。

基本操作步骤：

原代培养：取材→分离→培养，需保持材料新鲜及严格无菌2。

传代培养：贴壁细胞需胰酶消化，悬浮细胞可直接传代，离心后重悬分瓶23。

冻存与复苏：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻。

具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。

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注意事项与应用：

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。