BT-549人乳腺癌细胞

                                                           BT-549人乳腺癌细胞
产品信息：

BT-549细胞系源自72岁女性乳腺导管癌组织，呈上皮细胞样形态、贴壁生长，常用于癌症机制研究与药物筛选；培养时需用含10%FBS的RPMI-1640培养基，37℃、5% CO₂条件下培养，传代比例1:2–1:4；该细胞具多核巨细胞成分，能分泌粘蛋白样物质，生物安全等级为。

细胞说明

BT-549细胞于1978年由W.G. Coutinho和E.Y. Lasfargues从一名72岁白人女性乳腺导管癌组织中分离，来源肿瘤为乳头状浸润性导管癌，伴有局部淋巴结转移。该细胞形态包括上皮细胞样组分和多核巨细胞，可分泌粘蛋白样物质至培养基，常用于3D培养、癌症机制研究及药物筛选。其生物安全等级为1，需在二级生物安全台内操作，所有废液及接触器皿需高压灭菌后丢弃。

培养操作

培养基与条件：推荐使用RPMI-1640培养基（含10%胎牛血清、0.01 mg/mL胰岛素及1%青霉素/链霉素），培养环境为37℃、5% CO₂、饱和湿度。部分实验室使用专用培养基（如SNLM-271）以提升培养效率。

复苏与传代：

复苏：冻存管37℃水浴快速解冻，加入预热培养基混匀，1000 rpm离心5分钟弃上清，重悬后转入T25培养瓶，37℃培养箱过夜。

传代：当细胞密度达80%–90%，弃培养液，用PBS润洗1–2次，加入0.25%胰酶-EDTA消化液（1–2 mL）于37℃消化1–3分钟，镜下观察细胞间隙变大且未完全脱落时加入完全培养基终止消化，吹打混匀后按1:2–1:4比例分装至新培养瓶，补足培养基后37℃培养。传代周期一般为2–3天，换液频次每周2–3次。

冻存：收集对数生长期细胞，离心弃上清，用冻存液（如90% FBS+10% DMSO）重悬至密度不低于1×10⁶ cells/mL，分装至冻存管，程序降温（如-80℃过夜后转入液氮）长期保存。

细胞特性

生长与形态：贴壁生长，细胞形态为上皮细胞样（卵圆形、梭形或多角形），部分细胞呈多核巨细胞；培养时可能出现黑点（如细胞碎片或“黑胶虫”，需防控污染）。

分子与应用：染色体数目为超三倍体（模态数78，范围73–80），存在X染色体异常及标记染色体（如iso(13q)、10q+）；STR鉴定正确，常用于癌症研究（如转移机制、药物筛选）、3D培养及转染宿主。该细胞分泌粘蛋白样物质，适合研究肿瘤微环境与侵袭机制。

注意事项

收到细胞后需检查包装完整性及污染情况（如培养液浑浊、变黄提示细菌污染），镜下观察细胞形态并拍照记录。

消化传代时需严格控制胰酶作用时间，吹打细胞时轻柔操作避免产生气泡；培养时如黑点增多需排查污染或环境因素。

污染防控：支原体、细菌、真菌检测应为阴性，定期验证细胞活性与遗传稳定性。

细胞类型与特性：

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。

特殊细胞的生物特性举例：

成纤维细胞：具丰富粗面内质网、高尔基体，能合成胶原纤维、弹性纤维及有机基质；在外伤刺激下可恢复幼稚状态，参与组织修复。

肿瘤细胞：具无限增殖、贴壁依赖或悬浮生长、易转化等特性，常用于药物筛选与癌变机制研究。

神经干细胞：具多向分化潜能（可分化为神经元、星形胶质细胞等），增殖能力强，在体外培养中可形成克隆球。

注意事项与应用：

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。

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