EA.hy926人脐静脉细胞融合细胞

                                                              EA.hy926人脐静脉细胞融合细胞
产品信息：

别称:EA. hy 926;EA hy 926;EAhy 926;EAHY-926;EA.Hy926;EA.hy926;EAhy926;EaHy926;Eahy926

种属:人

生长特性:贴壁细胞

细胞形态:上皮细胞样

冻存条件:冻存液： 通用血清型程序冻存液

温度：液氮

培养方案A（默认）:生长培养基：DMEM/F12 +10% FBS +1% P/S

培养条件：气相：空气，95%；CO?，5%, 温度：37℃

推荐传代比例:1:3-1:4

推荐换液频率:2-3次/周

参考资料(来源文献)

背景描述:EA.hy926细胞是在PEG胁迫下，将原代培养的人脐静脉细胞与抗硫鸟嘌呤的A549克隆株融合，构建的一株人脐静脉细胞株。融合子在HAT培养基上生长，并以Ⅷ因子相关抗原筛选，EA.hy926细胞已经过100次以上的群体倍增（PDLs）。电镜照片显示，Weibel-Palade小体的细胞质分布以及组织特异性的细胞器，分化的内皮细胞特性如血管生成，体内平衡-血栓形成，血压及炎症反应。

年龄（性别）:Male

组织来源:脐静脉/体细胞杂交

细胞类型:杂交瘤细胞

生物安全等级:BSL-1

抗原表达情况:Factor VIII-related antigen; Homo sapiens, expressed

基因表达情况:Factor VIII-related antigen; Homo sapiens.

保藏机构:ATCC; CRL-2922

细胞来源与特性：

EA.hy926细胞系通过聚乙二醇（PEG）介导的人脐静脉内皮细胞与人肺癌细胞系A549的融合而建立。

细胞呈内皮细胞样形态，贴壁生长，表达内皮细胞标志物如von Willebrand因子（vWF）和Weibel-Palade小体，具有血管生成、炎症反应等内皮细胞功能。

培养条件：

培养基：推荐使用DMEM培养基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素溶液。

培养环境：37℃、5% CO?、饱和湿度的培养箱中培养。

传代步骤：

当细胞密度达到80%-90%时进行传代。

弃去旧培养基，用PBS润洗细胞1-2次。

加入胰酶-EDTA溶液消化细胞，显微镜下观察细胞变圆并脱落时，加入含血清的培养基终止消化。

轻轻吹打细胞，使其完全脱落，然后将细胞悬液收集到离心管中，1000rpm离心3-5分钟，弃去上清液。

用新鲜培养基重悬细胞，按1:2至1:4的比例接种到新的培养瓶中，补足培养基后放入培养箱继续培养。

冻存与复苏：

冻存：细胞密度达到80%-90%时，弃去培养基，用PBS润洗细胞。加入胰酶消化细胞，终止消化后收集细胞悬液。离心后弃去上清液，用冻存液（90%血清+10%DMSO）重悬细胞，调整细胞密度至1×10^6至1×10^7个/mL。将细胞分装到冻存管中，放入程序降温盒中，-80℃冰箱中过夜，之后转入液氮容器中长期保存。

复苏：从液氮中取出冻存管，迅速放入37℃水浴中摇晃解冻。将细胞悬液转移到含有完全培养基的离心管中，离心后弃去上清液，用培养基重悬细胞。将细胞悬液接种到培养瓶中，放入培养箱中培养过夜，第二天显微镜下观察细胞状态。

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注意事项:

细胞有明显的密度依赖。

对pH值敏感，最好使用培养皿或者透气盖培养，否则可能出现不贴壁，漂浮多的情况。