猪流行性腹泻病毒/猪冠状病毒/猪急性腹泻综合征冠状病毒（PEDV/PDCov/SADS）检测试剂盒（三重荧光PCR法）

猪流行性腹泻病毒/猪冠状病毒/猪急性腹泻综合征冠状病毒（PEDV/PDCov/SADS）检测试剂盒（三重荧光PCR法）

试剂盒核心定位：

靶标病原体

PEDV（猪流行性腹泻病毒）：靶向S1或N基因，覆盖经典株（G1）和变异株（G2）。

PDCoV（猪冠状病毒）：针对RdRp基因，可检测当前流行株（如中国谱系）。

SADS（猪急性腹泻综合征冠状病毒）：特异性识别ORF1a/b基因，与PEDV/PDCoV区分。

应用场景

猪群腹泻疫情的快速鉴别诊断。

种猪场或规模化养殖场的生物安全监测。

进出口检疫（PEDV为OIE通报病）。

二、技术原理与设计亮点：

三重荧光通道同步检测

PEDV：FAM通道（检测限≤10拷贝/μL）。

PDCoV：HEX/VIC通道（覆盖全球主要流行株）。

SADS：ROX/Cy5通道（特异性识别蝙蝠源SADS-CoV）。

高灵敏度与特异性

采用TaqMan-MGB探针技术，避免与猪肠道α冠状病毒（PEAV）等交叉反应。

预混冻干试剂设计，减少操作误差，适配紧急检测需求。

质控体系

内参基因（猪β-actin）监控样本质量。

包含无模板对照（NTC）和阳性标准品（定量范围10^1-10^7拷贝/μL）。

三、核心优势：

高效鉴别诊断

单次反应区分三种病原体，避免临床症状重叠（如PEDV与SADS均导致仔猪高死亡率）。

覆盖变异株

已验证对PEDV INDEL变异株（如S基因插入/缺失突变）的检测有效性。

快速响应

全程耗时≤1.5小时（含核酸提取），适用于现场筛查。

四、操作流程（简化版）：

样本处理：取粪便或肠道组织，使用病毒RNA提取试剂盒（如QIAamp Viral RNA Mini Kit）。

PCR扩增：

预混试剂配制→加样→运行程序（95℃ 2min→[95℃ 15s→60℃ 45s]×40循环）。

结果解读：

软件自动分析扩增曲线，Ct值≤35为阳性，35<Ct≤38建议复检。

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五、注意事项与局限性：

样本质量

粪便样本需避免反复冻融（RNA易降解）。

疫苗干扰

PEDV疫苗免疫猪群可能检测为阳性（需结合测序区分野毒）。

新发变异株

对非典型SADS变异株（如重组株）需进一步验证。