兔IL-1sRⅡelisa试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒用于定量检测兔血清、血浆或细胞培养上清液中可溶性白细胞介素-1受体Ⅱ型(IL-1sRⅡ)的含量。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)原理，具有高灵敏度、高特异性和良好的重复性。

检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。将抗兔IL-1sRⅡ单克隆抗体预包被于酶标板上，加入标准品或样本后，再加入生物素标记的抗兔IL-1sRⅡ抗体，形成抗体-抗原-抗体复合物。随后加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素，最后加入TMB底物显色。颜色的深浅与样本中IL-1sRⅡ的浓度成正比。

试剂盒组成

预包被酶标板：96孔(8孔×12条)

标准品(冻干粉)：2支(10ng/支)

标准品稀释液：1瓶(10ml)

生物素标记抗体：1瓶(120μl)

抗体稀释液：1瓶(10ml)

HRP标记链霉亲和素：1瓶(120μl)

酶结合物稀释液：1瓶(10ml)

TMB底物溶液：1瓶(10ml)

终止液：1瓶(10ml)

浓缩洗涤液(20×)：1瓶(25ml)

封板膜：2张

说明书：1份

样本要求

血清：室温血液自然凝固10-20分钟后离心收集上清

血浆：EDTA或肝素抗凝，离心收集上清

细胞培养上清：离心去除颗粒物

样本应避免反复冻融，短期可保存于2-8℃，长期保存应分装后冻存于-20℃或-80℃

操作步骤

标准品准备：用标准品稀释液溶解冻干标准品，配制系列浓度标准品(建议0、31.25、62.5、125、250、500、1000、2000pg/ml)

加样：每孔加入100μl标准品或样本，37℃孵育90分钟

洗涤：弃去液体，每孔加入350μl洗涤液，静置30秒后弃去，重复5次

加生物素标记抗体：每孔加入100μl稀释后的生物素标记抗体，37℃孵育60分钟

洗涤：同步骤3

加酶结合物：每孔加入100μl稀释后的HRP标记链霉亲和素，37℃孵育30分钟

洗涤：同步骤3

显色：每孔加入90μl TMB底物溶液，37℃避光孵育15-30分钟

终止：每孔加入50μl终止液

测定：450nm波长读取OD值(建议630nm作为参考波长)

结果计算

以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准曲线

根据样本OD值在标准曲线上查出相应浓度

若样本稀释过，计算时应乘以稀释倍数

性能参数

检测范围：31.25-2000pg/ml

最低检测限：15pg/ml

批内变异系数：<10%

批间变异系数：<15%

回收率：85%-115%

特异性：不与兔其他细胞因子发生交叉反应

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