兔sTNFR1/TNFRS1Aelisa试剂盒

商品属性

用途：本试剂盒用于体外定量检测兔血清、血浆、细胞上清液及组织样本中可溶性肿瘤坏死因子受体1（sTNFR1/TNFRS1A）的含量，适用于科研用途。

实验原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将抗sTNFR1抗体预包被于微孔板，加入待测样本和标准品后，与HRP标记的检测抗体形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。经洗涤后，加入TMB底物显色，在过氧化物酶催化下产生蓝色产物，酸化后转为黄色。颜色深度与样本中sTNFR1浓度呈正相关，通过450nm波长测定OD值，依据标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

| 组分 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存条件 |

| 预包被微孔板 | 1块 | 1块 | 2-8℃ |

| 标准品（冻干粉） | 2支 | 2支 | -20℃ |

| HRP标记检测抗体 | 1瓶 | 1瓶 | 2-8℃ |

| TMB显色液 | 1瓶 | 1瓶 | 避光2-8℃ |

| 终止液 | 1瓶 | 1瓶 | 2-8℃ |

| 洗涤缓冲液（20X） | 1瓶 | 1瓶 | 室温 |

样本处理要求

血清/血浆：全血室温静置2小时或4℃过夜后，1000×g离心20分钟，取上清检测。避免反复冻融，长期保存需-20℃或-80℃。

细胞上清液：离心去除颗粒物后直接检测或分装冻存。

组织匀浆：按重量体积比1:9加入PBS匀浆，离心取上清。

操作步骤

标准品稀释：用标准品稀释液复溶冻干粉，梯度稀释至所需浓度。

加样：每孔依次加入标准品或样本100μL，37℃孵育60分钟。

洗涤：弃液后每孔加洗涤液300μL，重复5次。

加检测抗体：每孔加HRP标记抗体50μL，37℃孵育30分钟。

显色：加入TMB底物100μL，避光反应15分钟。

终止与检测：加终止液50μL，30分钟内测定450nm OD值。

注意事项

安全性：避免接触终止液和显色液，操作时需佩戴防护用具。

稳定性：未开封试剂盒有效期6个月，开封后组分需按标签条件保存。

重复性：建议复孔检测，CV值应≤15%。

技术参数

检测范围：15.6-1000 pg/mL

灵敏度：<5 pg/mL

特异性：不与兔其他TNF受体家族交叉反应。

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