兔OPG/TNFRSF11Belisa试剂盒

商品属性

检测原理

双抗体夹心法 (Sandwich ELISA)

包被板：预包被抗兔OPG单克隆抗体于微孔板上。

加样：加入待测样本（血清/血浆/细胞上清）及系列标准品。

结合：样本中OPG与包被抗体结合。

加入检测抗体：加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体，形成“包被抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

洗涤：移除未结合物。

显色：加入底物TMB，HRP催化底物显蓝色。

终止：加入硫酸终止液，溶液变黄色。

读数：在450nm波长读取吸光度(OD值)。样品中OPG浓度与OD值成正比。

试剂盒主要组分 (96T)

预包被微孔板: 12条×8孔，可拆卸

兔OPG标准品: 冻干品或高浓度原液 (典型浓度范围：如10 - 1600 pg/mL，复溶后需系列稀释)

酶标结合物 (检测抗体): HRP标记抗兔OPG抗体浓缩液，需按说明书稀释

样本/标准品稀释液

20X 洗涤缓冲液: 使用前需用蒸馏水或去离子水1:20稀释

底物溶液 (TMB)

终止液 (1M/2M H₂SO₄)

封板膜

说明书 (此为关键！)

关键性能参数 (典型值，仅供参考)

检测范围: 通常为15.6 pg/mL - 1000 pg/mL 或 31.2 pg/mL - 2000 pg/mL (视具体厂家)

灵敏度 (最低检测限 LoD): 通常 < 10 pg/mL

精密度:

批内CV < 10%

批间CV < 15%

特异性: 可检测天然和重组兔OPG。与兔体内其他因子(如RANKL、其他TNF超家族成员)无明显交叉反应。

回收率: 通常在85% - 115%之间

所需设备 (用户自备)

37°C 恒温箱/培养箱

酶标仪 (450nm主波长，建议620/630nm作为参比波长扣除背景)

微量移液器 (1-10μL, 20-200μL, 100-1000μL) 及吸头

洗板机 (或手动洗瓶、多通道移液器)

蒸馏水/去离子水

涡旋振荡器

吸水纸

标准操作步骤

试剂准备: 溶解标准品并按图示梯度稀释。按需稀释酶标结合物。稀释20X洗液。

加样: 每孔加入100μL稀释好的标准品、待测样本、阴/阳性对照（如有）。设置空白孔（仅加稀释液）。轻叩混匀。

孵育: 37°C 孵育通常90分钟。

洗涤: 手动/洗板机洗板4-6次，每次注满洗涤液，拍干。

加酶标结合物: 每孔加入稀释好的酶标抗体100μL。空白孔不加。

孵育: 37°C 孵育通常30-60分钟。

洗涤: 重复步骤4。

加底物: 每孔（包括空白孔）加入TMB底物100μL，避光。

显色: 室温(25°C)避光显色15-25分钟 (或达到预期显色程度)。密切观察！

终止: 每孔加入终止液50μL（或100μL，按说明），轻摇匀。

读数: 30分钟内于450nm读OD值。

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