小鼠MIP-1β/CCL4elisa试剂盒

规格：96T/48T

保存条件：2-8℃避光保存，避免反复冻融

保质期：6个月

检测原理

采用双抗体夹心酶联免疫法（ELISA）。将抗小鼠MIP-1β/CCL4单克隆抗体预包被于微孔板中，加入样本或标准品后，生物素标记的检测抗体与样本中的MIP-1β/CCL4结合，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。加入HRP标记的链霉亲和素及TMB底物显色，通过450nm波长测定吸光度（OD值），标准曲线定量计算浓度。

主要组分

预包被微孔板

MIP-1β/CCL4标准品（冻干粉，需复溶）

生物素标记检测抗体

HRP标记链霉亲和素

TMB显色液、终止液

洗涤缓冲液（20×浓缩液）

样本要求

适用样本：小鼠血清、血浆、细胞培养上清液

样本处理：避免溶血或反复冻融，离心去除颗粒物，-20℃保存（长期需-80℃）。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释至1-1000 pg/mL。

加样：每孔加样本或标准品100μL，37℃孵育90分钟。

洗涤：弃液后加洗涤液洗板5次。

加检测抗体：每孔加生物素标记抗体100μL，37℃孵育60分钟。

加酶结合物：每孔加HRP标记链霉亲和素100μL，37℃避光孵育30分钟。

显色：加TMB底物90μL，避光反应15-30分钟（显蓝色梯度）。

终止：加终止液50μL，颜色转为黄色。

检测：450nm酶标仪读数（参考波长630nm）。

注意事项

试剂使用前平衡至室温，避免交叉污染。

显色时间需根据标准品梯度调整，避免过度反应。

实验废弃液需按生物危害处理。

本试剂盒仅限科研使用，不可用于临床诊断。

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