人MIP-3α/CCL20elisa试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒采用双抗体夹心法原理，专用于定量检测人血清、血浆、细胞培养上清液等样本中的MIP-3α/CCL20（巨噬细胞炎症蛋白-3α）含量。该蛋白属于CC趋化因子家族，参与炎症反应和免疫调节。

检测原理

包被抗体：微孔板预包被抗人MIP-3α/CCL20单克隆抗体。

样本孵育：加入待测样本，目标蛋白与固相抗体结合。

酶标抗体：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色反应：加入底物TMB，在HRP催化下产生蓝色产物，终止液（酸）作用后转为黄色。

结果读取：450 nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本浓度。

技术参数

检测范围：15.6–1000 pg/mL（具体以标准曲线为准）。

灵敏度：<5 pg/mL。

样本类型：血清、血浆（肝素/EDTA抗凝）、细胞上清液、组织匀浆液。

规格：48孔/板或96孔/板。

保存条件：试剂盒组分需按标签要求冷藏（2–8℃）或冷冻（-20℃），避免反复冻融。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释标准品。

加样：每孔加入样本或标准品100 μL，37℃孵育1–2小时。

洗涤：弃液后使用洗涤缓冲液清洗3次。

加酶标抗体：每孔加入HRP标记抗体100 μL，37℃孵育1小时。

显色与终止：加入TMB显色液避光反应15–30分钟，终止液终止反应。

检测：酶标仪读取450 nm OD值（建议双波长校正，参考波长630 nm）。

注意事项

避免溶血、脂血或反复冻融样本。

实验前平衡所有组分至室温（20–25℃）。

不同批次试剂盒组分不可混用。

质量控制

标准曲线R²值应≥0.99。

复孔检测变异系数（CV）需<10%。

应用领域

适用于炎症性疾病、肿瘤免疫、感染机制等研究。

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