人Fas/TNFRSF6elisa试剂盒

商品属性

检测原理

人Fas/TNFRSF6 ELISA试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（Sandwich ELISA）：

包被抗体：预先在酶标板孔中包被抗人Fas单克隆抗体。

样本与检测抗体：

加入待测样本（血清、血浆、细胞裂解液或培养上清）；

加入生物素标记的抗人Fas多克隆抗体，形成“抗体-抗原-生物素抗体”复合物。

信号放大与显色：

加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素；

加入底物TMB显色（蓝色→黄色），颜色深度与Fas浓度正相关。

检测样本类型

适用样本：人血清、血浆、细胞裂解液、细胞培养上清。

样本处理要求：

避免反复冻融，离心去除颗粒物；

短期保存于4℃，长期保存需-80℃分装。

检测对象与生物学背景

靶蛋白：Fas（TNFRSF6），属TNF受体超家族，介导细胞凋亡信号。

结构特点：

分子量约45 kDa（试剂盒标准品为细胞外区1-173aa融合人IgG1 Fc片段）；

存在跨膜型（激活凋亡）与可溶性型（sFas，可能抑制凋亡）。

表达位置：高表达于上皮细胞、肝细胞、淋巴细胞及肿瘤细胞。

结果判读与注意事项

定量方法：

标准品梯度稀释（建议做5-7点标准曲线）；

450nm波长测定OD值，计算样本浓度。

关键操作注意事项：

洗涤彻底性：避免残留物导致假阳性（推荐使用洗板机）；

封闭有效性：使用BSA或脱脂奶粉封闭非特异性结合位点；

温育时间：严格遵循说明书要求，避免反应不充分或过度。

试剂盒局限性：

仅限科研使用，不可用于临床诊断；

不同样本类型（如血清vs细胞上清）可能需优化稀释倍数。

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