大鼠Fas/TNFRSF6elisa试剂盒 新品

产品介绍：

一、试剂盒核心信息

检测目标：大鼠Fas（CD95/TNFRSF6），一种凋亡相关受体，通过结合FasL激活死亡信号通路，调控细胞程序性死亡。

方法学：双抗体夹心ELISA（主流方案），特异性检测可溶性Fas（sFas）及膜结合型Fas片段。

适用样本：血清、血浆（EDTA抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆（如脾脏、胸腺，需添加蛋白酶抑制剂）。

二、关键组分与性能特点

1. 主要组分

预包被板：抗大鼠Fas单抗包被的96孔板（部分品牌提供可拆卸条板）。

标准品：重组大鼠Fas（浓度梯度通常为10–2000 pg/mL，覆盖凋亡模型中的表达范围）。

检测系统：生物素-链霉亲和素-HRP放大系统，TMB显色（终止后黄色，450 nm检测）。

辅助试剂：样本稀释液（含Triton X-100，增强膜结合型Fas释放）。

2. 性能参数

灵敏度：最低检测限可达3 pg/mL（超敏版本可至0.5 pg/mL）。

特异性：不与大鼠TNF-R1、DR4/5交叉反应。

稳定性：未开封试剂盒4℃保存有效期至2026年（标准品需-80℃冻存）。

三、实验流程与优化建议

1. 典型步骤

① 样本预处理（组织匀浆需超声破碎，离心取上清）→

② 加样孵育（37℃ 2小时）→

③ 洗涤→

④ 加酶标二抗（1小时）→

⑤ 显色终止→

⑥ 读数（450 nm，参考630 nm校正）。

2. 关键注意事项

样本保存：sFas在-80℃可稳定6个月，避免反复冻融（建议分装）。

干扰排除：高浓度可溶性FasL（>10 ng/mL）可能竞争性抑制检测。

标准曲线拟合：推荐四参数逻辑（4PL）模型，尤其关注低浓度区间。

四、应用场景

凋亡机制研究：肝损伤、神经退行性疾病中Fas/FasL通路的激活。

自身免疫疾病：如系统性红斑狼疮（SLE）模型中Fas介导的淋巴细胞凋亡异常。

肿瘤免疫：评估肿瘤细胞通过sFas逃避免疫清除的机制。

五、时效性提示

技术更新：2025年部分品牌推出“多重检测版”，可同步检测Fas、FasL及Caspase-3活性片段。

替代方案：若需定位Fas膜表达，建议结合流式细胞术或免疫组化（IHC）。

ELISA试剂盒的主要优点缺点

维度  优势 (Pros) 劣势 (Cons)

检测性能   灵敏度极高，特异性强，结果准确  可能存在交叉反应，易受干扰物影响

操作体验   流程标准化，无需昂贵设备，适合高通量检测   步骤多且繁琐，耗时较长，对操作技巧有要求

经济成本   适合大批量样本检测，长期看性价比尚可   单次试剂成本较高，且不同批次可能存在差异

应用范围   可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本   对样本质量（如是否溶血）敏感

公司正在出售的产品：

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。