人腺苷酸环化酶关联蛋白1(CAP1)elisa试剂盒

1. 基本介绍

目标分子：腺苷酸环化酶关联蛋白1（Adenylyl Cyclase-Associated Protein 1, CAP1），是一种高度保守的肌动蛋白结合蛋白，参与细胞骨架重组、信号转导和细胞迁移等关键生物学过程。

生物学功能：

调控肌动蛋白细胞骨架动态

参与G蛋白偶联受体（GPCR）信号通路

影响细胞迁移和炎症反应

与肿瘤发生发展相关（如乳腺癌、结肠癌）

 研究应用：

肿瘤微环境研究

免疫细胞迁移机制探索

神经退行性疾病研究

心血管疾病机制研究

2. 检测原理

双抗体夹心ELISA法：

捕获抗体：微孔板预包被抗CAP1单克隆抗体

样本孵育：样本中的CAP1与固相抗体特异性结合

检测抗体：加入生物素标记的抗CAP1多克隆抗体

信号放大：链霉亲和素-HRP复合物与生物素结合

显色反应：TMB底物显色，450nm测定吸光度

3. 试剂盒组成

组分  规格  保存条件

预包被微孔板  96T（8×12可拆）  2-8℃

CAP1标准品  0.5-50 ng/mL（7个梯度）  -20℃

生物素标记检测抗体  1.2mL  -20℃

链霉亲和素-HRP  1.2mL  -20℃（避光）

细胞裂解缓冲液  10mL  2-8℃

TMB底物  10mL  2-8℃（避光）

终止液  10mL  室温

20×洗涤缓冲液  50mL  室温

4. 样本要求

适用样本：

细胞裂解液（推荐使用配套裂解缓冲液）

组织匀浆（推荐RIPA裂解液）

血清/血浆（EDTA抗凝）

细胞培养上清

样本制备：

细胞样本：

收集1×10?个细胞

加入100μL裂解缓冲液

冰上裂解30分钟

12000×g离心10分钟（4℃）

取上清检测

组织样本：

按1:10（w/v）加入裂解液

匀浆后冰上裂解1小时

离心取上清

5. 检测流程

标准操作步骤：

标准品稀释：制备0.5、1、5、10、20、50 ng/mL梯度

加样：标准品/样本100μL/孔，37℃孵育2小时

洗涤：自动洗板机洗5次（300μL/孔）

加检测抗体：100μL/孔，37℃孵育1小时

加链霉亲和素-HRP：100μL/孔，37℃孵育30分钟

显色：TMB避光反应15-20分钟

终止：50μL终止液

读值：450nm主波长，630nm参比波长

6. 技术参数

参数  性能指标

检测范围  0.5-50 ng/mL

最低检测限  0.2 ng/mL

批内精密度  CV<8%

批间精密度  CV<12%

回收率  85-115%

特异性  不与CAP2、CAP3交叉反应

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