人通道激活蛋白酶1(CAP1)ELISA试剂盒 新品

预期用途

本试剂盒采用酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测人血清、血浆、细胞培养上清或其他生物液体中CAP1的浓度，仅限科研使用，不可用于临床诊断。

检测原理

采用双抗体夹心法：

微孔板预包被抗CAP1抗体，捕获样本中的CAP1抗原；

依次加入生物素化检测抗体、HRP标记的链霉亲和素，形成复合物；

TMB底物显色，在过氧化物酶催化下产生蓝色产物，酸性终止后转为黄色；

450 nm波长下测定吸光度（OD值），OD值与CAP1浓度呈正相关。

主要组分

预包被微孔板

CAP1标准品（浓度梯度）

生物素化检测抗体

HRP标记亲和素

TMB显色液、终止液

洗涤缓冲液（浓缩液，需稀释）

封板膜

样本处理与保存

样本类型

血清/血浆：采集后3000 rpm离心10-30分钟（血浆需抗凝处理），分装保存于-20℃，避免反复冻融。

细胞上清：离心去除颗粒后检测或冻存。

组织匀浆：生理盐水匀浆后离心取上清。

操作步骤

试剂准备：将浓缩洗涤液稀释至工作浓度，标准品按说明书复溶。

加样：每孔加入样本或标准品，37℃孵育30分钟。

洗涤：弃液后加洗涤液清洗3次。

检测抗体孵育：加入生物素化抗体，37℃反应30分钟，再次洗涤。

酶结合物反应：加入HRP标记亲和素，37℃避光孵育10分钟，洗涤。

显色与终止：每孔加TMB显色液，避光反应15分钟，加终止液后读数。

注意事项

保存条件：未开封试剂盒-20℃保存（有效期6个月）；开封后微孔板需密封防潮，2-8℃保存。

交叉污染：避免移液枪头重复使用。

显色控制：终止后10分钟内完成OD值测定。

异常处理：若浓缩洗涤液出现盐结晶，37℃水浴助溶后使用。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过曲线方程计算样本浓度。

性能参数

灵敏度：≤1.0 pg/mL

特异性：不与CAP1类似蛋白交叉反应。

精密度：板内、板间变异系数均<10%。

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