人嗜铬蛋白A(CHGA)elisa试剂盒

1. 基本介绍

目标分子：嗜铬蛋白A（Chromogranin A, CHGA），属于嗜铬蛋白家族，广泛分布于神经内分泌细胞（如肾上腺髓质、胰岛β细胞、肠嗜铬细胞等）及其肿瘤组织中。

临床意义：

神经内分泌肿瘤（NETs）：如嗜铬细胞瘤、副神经节瘤、胰岛细胞瘤、类癌瘤等。

小细胞肺癌（SCLC）：部分SCLC患者CHGA水平升高。

心血管疾病：CHGA可能参与高血压和心力衰竭的病理过程（如嗜铬细胞瘤相关高血压）。

其他：如慢性萎缩性胃炎（胃神经内分泌肿瘤风险标志物）。

 2. 检测原理

采用双抗体夹心ELISA法：

捕获抗体：微孔板上预包被抗CHGA单抗或多抗。

样本孵育：样本中的CHGA与固相抗体结合。

检测抗体：加入酶（HRP或ALP）标记的二抗，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色反应：加入TMB等底物，酶催化显色，颜色深浅与CHGA浓度成正比。

终止反应：加入终止液（如硫酸），在450nm波长下测定吸光度（OD值）。

3. 试剂盒组成

典型组分包括：

预包被微孔板（96孔，可拆）

CHGA标准品（0、10、50、100、200、500 pg/mL 或 ng/mL，依品牌不同）

样本稀释液

酶标二抗（HRP或ALP标记）

洗涤缓冲液（10×或20×浓缩液）

显色底物（TMB或OPD）

终止液（1M H?SO? 或类似）

封板膜

说明书

4. 适用样本类型

血清（推荐无溶血、无脂血）

血浆（EDTA或肝素抗凝，避免反复冻融）

组织匀浆液（需适当处理）

细胞培养上清（需离心去除碎片）

样本储存：短期可2-8℃保存，长期建议-20℃或-80℃冻存，避免反复冻融。

5. 操作步骤（简要流程）

标准品稀释：制备系列浓度梯度（如0、10、50、100、200、500 pg/mL）。

加样：标准品和样本加入对应孔中（通常100μL/孔），37℃孵育1-2小时。

洗涤：用洗涤液洗板3-5次，去除未结合物质。

加酶标抗体：加入HRP标记的二抗，37℃孵育30-60分钟。

显色：加入TMB底物，避光反应10-30分钟（显蓝色）。

终止：加入终止液（变黄色）。

检测：酶标仪读取450nm（参考波长630nm）OD值，绘制标准曲线计算浓度。

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