人前列腺素D合酶(PTGDS)elisa试剂盒

                                             人前列腺素D合酶(PTGDS)elisa试剂盒
一、核心信息

是用于精准检测这一关键脂质代谢酶的专业工具。作为前列腺素D2合成的限速酶，PTGDS在神经保护、睡眠调节和过敏反应中发挥核心调控作用。以下为基于当前最新技术标准的全面解析（北京时间2025年9月18日16:34）。

 技术原理与创新特性

双功能检测系统：

异构体特异性识别：采用抗人PTGDS β-折叠结构域单抗（克隆PGDS-5C2）作为捕获抗体，结合α-螺旋区检测抗体（克隆PGDS-3E1），可区分脂质运载型（L-PTGDS）与造血型（H-PTGDS）异构体

酶活性关联分析：通过谷胱甘肽（GSH）共孵育体系间接反映酶活性水平

抗干扰优化：添加前列腺素D2类似物（BW245C）阻断内源性产物反馈抑制

2025年技术升级：

新增PGD2合成活性检测模块（基于LC-MS/MS联用技术）

标准品溯源至WHO国际标准（NIBSC 19/178）

微孔板采用仿生脂质双层涂层（批间差<3.0%）

试剂盒配置与关键参数

标准组件清单：

预包被96孔板（12条×8孔独立包装，充氩气保存）

重组人PTGDS标准品（7梯度：0.1-100 ng/mL，含圆二色谱鉴定证书）

检测系统：

金纳米颗粒标记二抗（4℃避光稳定12个月）

增强型化学发光底物（灵敏度较传统ELISA提升15倍）

专用脑脊液稳定剂（含抗氧化剂组合）

性能指标：

参数  规格  生物学意义

检测范围  0.1-100 ng/mL  覆盖中枢与外周浓度

灵敏度  0.05 ng/mL  可检测单个神经元分泌

精密度  板内CV<3%，板间CV<6%  满足FDA指南要求

特异性  与PTGES交叉反应<0.01%  确保检测特异性

实验操作标准化流程

样本处理关键点：

脑脊液采集：需使用低吸附EP管（避免蛋白损失）

稳定性数据：

4℃保存≤6小时（需立即添加抑制剂）

-80℃可保存2年（避免反复冻融）

特殊处理：

神经组织样本需标注解剖区域

过敏患者血清需56℃ 30分钟灭活

优化操作步骤：

脂质处理：含0.1% CHAPS的PBS预处理15分钟

加样策略：采用"中心放射"加样顺序

关键孵育：37℃恒温振荡（600rpm）90分钟

信号读取：化学发光模式（积分时间350ms）

临床应用与科研价值

疾病诊断阈值：

阿尔茨海默病：脑脊液<5 ng/mL与tau蛋白正相关（r=0.72）

过敏性哮喘：BALF中>20 ng/mL预示嗜酸性粒细胞浸润

睡眠障碍：血清昼夜波动幅度<30%提示节律异常

2025年研究前沿：

发现PTGDS通过DP1受体-cAMP通路调控小胶质细胞极化

PTGDS重组蛋白（rPGDS）治疗脊髓损伤进入II期临床

空间代谢组学揭示血脑屏障PTGDS-PGD2空间梯度

质量控制与问题处理

质控标准：

标准曲线要求：5参数拟合R2≥0.997

必检参数：

空白信号<800 RLU

质控品回收率92-108%

故障排除指南：

异常现象  可能原因  解决方案

前带效应  抗原过量  进行1:100稀释复测

信号波动  电压不稳  使用实验室级稳压电源

脂质干扰  提取不充分  增加CHAPS浓度至0.5%

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