人Free Soluble RANKLelisa试剂盒

                                             人Free Soluble RANKLelisa试剂盒
一、核心信息

实验原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。预先包被抗人RANKL捕获抗体的微孔板中，依次加入标准品、质控品和样本，温育后洗涤。再加入HRP标记的检测抗体，形成"抗体-RANKL-酶标抗体"复合物。加入底物TMB显色，颜色深浅与RANKL浓度正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本中RANKL的浓度。

 检测性能

灵敏度：最低检测限为0.2 pg/mL（0.01 pmol/L）。

检测范围：0–40 pg/mL（0–2 pmol/L）。

特异性：仅检测游离可溶性RANKL，与骨保护素（OPG）等无交叉反应。

精密度：板内变异系数≤5%，板间变异系数≤3%。

稳定性：样本在-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。

适用样本及处理

样本类型：血清、血浆（EDTA或肝素抗凝）、细胞培养上清、组织匀浆等。

处理要求：

血清/血浆：室温放置或4℃过夜，1000×g离心20分钟，取上清。

细胞培养上清：1000×g离心20分钟，取上清。

组织匀浆：用预冷PBS冲洗组织，剪碎后匀浆，5000×g离心5-10分钟，取上清。

试剂盒组成

预包被酶标板：96孔或48孔，包被抗人RANKL捕获抗体。

标准品：不同浓度的RANKL标准品，用于绘制标准曲线。

检测抗体：HRP标记的抗人RANKL检测抗体。

洗涤液：用于洗涤未结合的物质。

底物液：TMB显色液。

终止液：酸性溶液，终止显色反应。

其他：封板膜、说明书等。

操作步骤

准备：平衡试剂盒至室温，稀释洗涤液。

加样：加入标准品和样本，37℃温育。

洗板：洗涤液洗涤，去除未结合物质。

加检测抗体：加入HRP标记的检测抗体，温育。

洗板：再次洗涤，去除未结合的检测抗体。

显色：加入TMB底物液，避光孵育。

终止反应：加入终止液终止显色。

测定：酶标仪在450nm波长下测定OD值。

注意事项

样本处理：避免溶血样本，正确离心和保存样本。

操作规范：严格按说明书操作，避免交叉污染。

质量控制：每次实验做标准曲线，确保结果准确。

应用领域

科研研究：用于研究RANKL在骨代谢、免疫调节等生理和病理过程中的作用。

疾病诊断：辅助诊断与RANKL异常相关的疾病，如骨质疏松症、类风湿性关节炎等14

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