大鼠同线蛋白2(ST2)elisa试剂盒

                                             大鼠同线蛋白2(ST2)elisa试剂盒
一、核心检测信息

1. 检测原理

采用双抗体夹心ELISA技术，特异性识别大鼠ST2的两种亚型：

可溶型（sST2）：检测范围0.1-50ng/mL（识别IgG-Fc融合蛋白结构域）

膜结合型（ST2L）：需先用蛋白酶K处理样本（识别胞外区）

预包被抗大鼠ST2单抗（克隆号：RMST2-1）捕获目标蛋白，生物素标记的二抗通过链霉亲和素-HRP系统催化超敏TMB显色。

 2. 核心组分

组分  规格  保存条件  关键特性

预包被板  96T  2-8℃（含干燥剂）  高亲和力单抗（Kd=0.15nM）

重组标准品  0-50ng/mL  -80℃  含sST2和ST2L混合标准

心肌裂解液  20mL  -20℃  含蛋白酶抑制剂鸡尾酒

血清转化液  5mL  4℃  含1mM PMSF

IL-33刺激剂  0.5mL  -20℃  重组大鼠IL-33（10μg/mL）

性能参数

检测范围：

sST2：0.1-50ng/mL（可扩展至200ng/mL）

ST2L：需额外蛋白酶处理（检测下限0.5ng/mL）

灵敏度：0.04ng/mL（基于2.5SD空白值）

样本兼容性：

最佳：心肌梗死边缘区组织

适用：血清（避免溶血）、支气管肺泡灌洗液

交叉反应：

大鼠ST2：100%

IL-1R/IL-18R：<0.01%

人ST2：8%（识别保守表位）

精密度：

批内CV：5.8-7.2%

批间CV：8.9-11.3%

样本处理规范

4.1 心肌组织处理

取梗死边缘区50mg

加入450μL冷裂解液

珠磨仪匀浆（4℃，40Hz，30秒）

4℃ 15000×g离心30分钟

4.2 ST2L检测处理

组织匀浆加入蛋白酶K（终浓度50μg/mL）

37℃消化1小时后立即冰浴终止

加入5mM EDTA抑制残余酶活

4.3 血清采集

使用硅化真空采血管

室温凝固30分钟后离心（2000×g，15min）

分装后-80℃保存（≤3次冻融）

实验操作要点

标准曲线制备

梯度稀释：0、0.1、0.5、1、5、10、25、50ng/mL

复溶液：含0.1% BSA的PBS（pH7.2）

关键步骤控制

孵育条件：37℃恒温振荡（200rpm）

洗板液：含0.02% Tween-20的TBS

显色终止：2M HSO（终止更彻底）

质控标准

空白OD值：≤0.08

IL-33刺激阳性对照：≥20ng/mL

稀释线性：80-120%回收率

主要应用方向

心血管疾病：心肌纤维化预后评估

哮喘模型：Th2型炎症监测

器官移植：排斥反应早期预警

肿瘤微环境：髓系抑制细胞研究

注意事项

实验设计

推荐同步检测IL-33（ST2配体）

必须设置：假手术组/正常对照组

干扰控制

避免使用EDTA血浆（影响蛋白酶处理）

溶血样本需超速离心（12000×g，15min）

数据分析

推荐五参数logistic曲线拟合

心肌数据需用总蛋白校正（ng/mg）

公司正在出售的产品：