大鼠同线蛋白2(ST2)ELISA试剂盒

概述

检测物种： 大鼠（Rat）

检测样本： 血清、血浆、细胞上清液、组织匀浆液

检测范围： 通常为 15.6 pg/mL - 1000 pg/mL（以实际试剂盒为准）

灵敏度： ≤5.0 pg/mL

检测时长： 约 4.5 小时

保存条件： 试剂盒组分于 2-8℃ 保存（详见各组分标签）

试剂盒组成

| 组分 | 规格 | 数量 |

| 预包被抗大鼠sST2抗体微孔板 | 96孔 | 1块 |

| sST2标准品 | 冻干粉/液体 | 6-8管 |

| 生物素标记检测抗体 | 1瓶 | 1瓶 |

| HRP标记链霉亲和素 | 1瓶 | 1瓶 |

| 样品稀释液 | 20mL | 1瓶 |

| TMB底物液 | 10mL | 1瓶 |

| 终止液（2M H₂SO₄） | 10mL | 1瓶 |

| 浓缩洗涤液（25×） | 50mL | 1瓶 |

| 封板膜 | - | 4张 |

样本处理

血清/血浆：

血液静置30分钟后离心（2000×g, 10分钟），分离血清。

EDTA/肝素抗凝血浆需立即离心。

-20℃或-80℃冻存（避免反复冻融）。

组织匀浆：

称重后加入裂解液匀浆，离心取上清液。

细胞上清：

离心去除悬浮细胞后直接检测或冻存。

注意： 样本需用试剂盒提供的样品稀释液按说明书比例稀释（通常1:2至1:5）。

操作步骤

准备工作：

恢复标准品及试剂至室温（20-25℃）。

20×洗涤液用蒸馏水稀释至工作浓度。

标准品稀释：

按说明书梯度稀释标准品（例：0, 31.2, 62.5, 125, 250, 500, 1000 pg/mL）。

加样：

加入100μL标准品/样本至微孔板，37℃孵育90分钟。

加检测抗体：

洗板3次，每孔加生物素标记抗体100μL，37℃孵育60分钟。

加酶结合物：

洗板3次，每孔加HRP-链霉亲和素100μL，37℃孵育30分钟（避光）。

显色：

洗板5次，每孔加TMB底物90μL，37℃避光显色15-30分钟。

终止与读数：

加终止液50μL/孔，30分钟内于450nm波长测OD值（校正波长630nm）。

结果计算

以标准品浓度为横坐标（log坐标），OD值为纵坐标，拟合标准曲线（四参数/双对数方程）。

根据样本OD值计算sST2浓度。

关键参数

| 项目 | 结果 |

| 精密度（CV） | 板内变异<8%，板间变异 <10% |

| 回收率 | 85%-115% |

| 特异性 | 不与大鼠IL-1、IL-6交叉反应 |

| 稳定性 | 批内稳定，开盖后避免污染 |

注意事项

避免反复冻融试剂和样本。

TMB显色时密切观察颜色变化（蓝→黄）。

使用前确认微孔板干燥无气泡。

所有样本及废弃物按生物有害物处理。

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