大鼠酸性糖蛋白(AGP)elisa试剂盒

一、核心检测信息

检测目标

特异性定量大鼠血清、腹水或炎症组织渗出液中的 AGP，一种由肝脏合成的急性期反应蛋白，通过调控免疫细胞迁移和药物结合能力，参与炎症反应、感染性疾病及肿瘤微环境重塑。

 检测原理

双抗体夹心ELISA：

预包被抗大鼠AGP单抗（靶向核心肽链）捕获目标蛋白 → 生物素标记二抗（识别唾液酸化糖链）结合 → 高敏HRP-TMB显色系统（450nm/630nm双波长校正）。

糖型分析模块：可选配植物凝集素（如Con A）检测不同糖基化修饰亚型。

二、技术参数与验证

关键指标  技术说明

检测范围  5-1000 μg/mL（覆盖生理至脓毒症水平）

最低检测限  1.5 μg/mL

样本兼容性  血清（避免脂血）、胸腔积液（需离心）、炎症组织匀浆（含0.1% NP-40）

糖型特异性  可区分Con A强结合型（炎症相关）与弱结合型

批间差异  CV＜7%（国际标准品ORM-1校准）

三、典型应用场景

炎症监测

盲肠结扎穿孔（CLP）脓毒症模型中AGP动态变化与SOFA评分的相关性

药物代谢研究

AGP水平对碱性药物（如普萘洛尔）血浆蛋白结合率的影响评估

肿瘤恶病质

肝癌模型血清AGP升高与IL-6驱动的急性期反应关联

四、操作关键要点

样本处理

炎症样本：采集后需立即分离血清（避免室温下AGP降解）

糖型分析：需额外进行Con A亲和层析预处理

实验优化

高浓度样本需1:20稀释（使用含0.1% Tween-20的PBS）

每板设置LPS刺激阳性对照（10mg/kg处理大鼠血清）

五、质控要求：

每板需包含：空白孔、跨板质控品（Z值≤2）、回收率测试（90-110%）

注意事项

干扰因素

高浓度胆红素（＞20mg/dL）需用抗氧化剂预处理

数据解读

建议联合检测CRP和SAA以全面评估急性期反应

样本保存

血清-80℃分装（冻融≤3次），避免-20℃长期储存导致糖链水解

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