大鼠软骨寡聚基质蛋白(COMP)elisa试剂盒

一、核心检测信息

检测目标

特异性定量大鼠血清、关节滑液或软骨组织提取物中的 COMP，一种由软骨细胞分泌的五聚体糖蛋白，通过调控胶原纤维网络组装参与软骨稳态，其异常降解与骨关节炎（OA）、类风湿关节炎（RA）及软骨损伤密切相关。

检测原理

双抗体夹心ELISA：

预包被抗大鼠COMP单抗（靶向TSP-1结构域）捕获目标蛋白 → 生物素标记二抗（识别EGF样重复序列）结合 → 高敏AP-TMB显色系统（405nm/参考波长620nm）。

特殊设计：含EDTA缓冲液防止金属离子依赖性降解。

 二、技术参数与验证

关键指标  技术说明

检测范围  0.5-100 ng/mL（覆盖生理至病理浓度）

最低检测限  0.15 ng/mL（可检测早期软骨损伤）

样本兼容性  血清（避免反复冻融）、关节滑液（需透明质酸酶处理）、软骨裂解液（含蛋白酶抑制剂）

五聚体稳定性  试剂盒含2% SDS维持天然构象

批间差异  CV＜9%（国际标准品校准）

三、典型应用场景

骨关节炎研究

前交叉韧带切断（ACLT）模型中血清COMP动态变化与软骨Mankin评分的相关性

软骨修复评估

骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植后COMP水平反映基质再生效率

运动医学

长期跑台训练大鼠关节COMP降解与机械负荷的剂量效应关系

四、操作关键要点

样本处理

软骨组织：液氮研磨后需用4M GuHCl溶液（含10mM N-乙基马来酰亚胺）充分提取

滑液样本：离心去除细胞碎片（2000×g, 10min），-80℃单次冻存

实验优化

高浓度样本建议1:10稀释（使用含1% BSA的TBS缓冲液）

每板设置胶原酶II消化阳性对照（模拟OA病理状态）

五、注意事项

临床前意义

血清COMP＞60 ng/mL提示大鼠软骨显著降解（人类参考阈值≈8 ng/mL）

联合检测建议

推荐与CTX-II、aggrecan ARGS片段联检，全面评估软骨代谢

样本保存

分离血清-80℃保存（冻融≤2次），避免-20℃长期储存导致五聚体解离

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