小鼠纤维蛋白原(FG)ELISA试剂盒

预期用途

本试剂盒用于定量测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中纤维蛋白原(FG/Fb/Fbg)的含量。

仅供研究使用，不可用于诊断。

实验原理

采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。

步骤：

纯化的抗小鼠纤维蛋白原抗体预先包被于微孔板（固相抗体）。

依次加入待测样本（含抗原）、酶标抗体（摘要1,2为HRP标记的抗体，摘要3为生物素化抗体 + HRP标记亲和素）。

形成固相抗体 - 纤维蛋白原抗原 - 酶标抗体复合物。

彻底洗涤去除未结合物质。

加入底物TMB（3,3',5,5'-四甲基联苯胺）显色。TMB在HRP（辣根过氧化物酶）催化下先变蓝，后经酸终止反应变成黄色。

使用酶标仪在450nm波长下检测各孔的吸光度值(OD值)。

样品中的纤维蛋白原浓度与OD值呈正相关，通过绘制标准曲线即可计算出样品中的具体浓度。

试剂盒组成

酶联板 (Microelisa Strip Plate)： 1块（96孔预包被固相抗体）。

标准品 (Standard)： 2瓶（冻干品），临用前用样品稀释液稀释至1ml，浓度为100 ug/mL。需进行系列倍比稀释（如：100, 50, 25, 12.5, 6.25, 3.12, 1.56 ug/mL，0 ug/mL）。 (注：摘要1,2未详述浓度，仅提及标准曲线)

样品稀释液 (Sample Diluent)： 1瓶（20ml），用于稀释标准品和部分样本。

检测抗体（酶标抗体或生物素化抗体）：

摘要1,2: HRP标记的纤维蛋白原(Fb)抗体

摘要3: 生物素化抗小鼠Fbg抗体 + HRP标记的亲和素 (Streptavidin-HRP)

洗涤缓冲液 (Wash Buffer)： 浓缩液，需按要求稀释（如：20ml浓稀释液加蒸馏水至480ml或600ml）。

底物A液/底物B液 (Substrate A/B)： TMB显色底物。 (摘要1,2未详述)

终止液 (Stop Solution)： 酸溶液（通常为硫酸），用于终止显色反应。

封板膜 (Plate Sealer)： 2片（用于96孔板）。

说明书 (Instruction)： 1份。

样本要求

适用样本类型： 小鼠血清、血浆、细胞培养上清液及其他相关生物液体。

样本处理： 样本采集后应尽快离心分离，避免反复冻融。具体的保存条件（短期/长期）和稀释要求需参照试剂盒具体说明或标准操作规程。

注意事项

实验前请仔细阅读说明书全文。

不同批次的试剂组分不可混用。

在合适的有效期内使用试剂盒。

严格按照规定进行试剂保存（如冷藏、避光、冻干品等）。

使用干净的吸头和容器，避免交叉污染。

底物TMB具有潜在致癌性，操作时应戴手套并在接触后彻底洗手。

终止液（通常为酸）具有腐蚀性，需小心操作，避免接触皮肤和衣物。

实验操作需符合相关生物安全规范。

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