人血管内皮生长因子165(VEGF165)ELISA试剂盒 新品

商品属性

产品用途

本试剂盒用于定量检测人血清、细胞上清液及相关液体样本中血管内皮生长因子165（VEGF165）的浓度，适用于科研领域。

实验原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。微孔板预包被纯化的人VEGF165抗体，形成固相抗体。样本中的VEGF165与固相抗体结合后，再与辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经洗涤去除未结合物，加入底物TMB显色，在HRP催化下产生蓝色产物，酸化后转为黄色。颜色深度与样本中VEGF165浓度呈正相关，通过450 nm波长测定吸光度（OD值），依据标准曲线计算浓度。

主要组成

预包被微孔板

VEGF165标准品

HRP标记检测抗体

TMB显色液

终止液

洗涤缓冲液（浓缩）

样本要求

类型：血清、血浆、细胞上清液、组织匀浆等。

保存：2-8℃短期保存，长期需分装冻存于-20℃以下，避免反复冻融。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释。

加样：每孔加入样本或标准品，37℃孵育。

洗涤：弃液体，洗涤缓冲液洗板5次。

加酶标抗体：每孔加入HRP标记抗体，37℃孵育。

显色：加入TMB底物，避光反应后终止。

检测：酶标仪450 nm读取OD值。

注意事项

安全防护：避免直接接触终止液及显色底物，操作时穿戴防护用具。

实验环境：避免强光照射，室温波动需控制在18-25℃。

试剂保存：未使用组分需按标签要求（2-8℃或-20℃）保存，避免反复冻融。

质量控制：建议每批次实验设置复孔及质控样本。

局限性

仅限科研使用，不可用于临床诊断。

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