人胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)ELISA试剂盒

商品属性

预期用途

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），用于定量检测人血清、血浆或其他生物液体样本中胰岛素样生长因子结合蛋白6（IGFBP-6）的浓度。本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。

实验原理

包被：微孔板预包被高纯度人IGFBP-6特异性抗体。

样本孵育：加入待测样本或标准品，样本中的IGFBP-6与包被抗体结合。

标记抗体结合：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色反应：加入TMB底物后，在HRP催化下产生蓝色产物，酸性终止液终止反应并转化为黄色。

定量分析：于450nm波长测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本中IGFBP-6浓度。

试剂盒组成

预包被96孔板：1块

标准品（冻干粉）：2支

标准品稀释液：1×20mL

HRP标记检测抗体：120μL

抗体稀释液（2×）：6mL

TMB底物溶液：9mL

终止液：6mL

30×浓缩洗涤液：20mL

封板膜：4张

需自备器材

酶标仪（450nm滤光片）

微量加样器及吸头

蒸馏水或去离子水

EP管、吸水纸、洗板机（可选）

储存条件及有效期

未开封试剂盒：2–8℃保存，有效期12个月。

开封后：标准品分装冻存（-20℃），其他组分4℃保存，1个月内使用。

注意事项

避免反复冻融标准品或样本。

实验前平衡所有组分至室温（20–25℃）。

洗涤时确保充分去除未结合物质，避免假阳性。

操作步骤摘要

标准品复溶与稀释：用标准品稀释液配制系列浓度梯度。

加样：每孔加入样本或标准品100μL，37℃孵育90分钟。

洗涤：弃液后每孔加洗涤液300μL，重复5次。

加检测抗体：每孔加入HRP标记抗体100μL，37℃孵育60分钟。

显色与终止：加入TMB底物避光反应15–30分钟，终止后30分钟内读数。

数据计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过四参数拟合方程计算样本浓度。

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