人促红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒 新品

商品属性

产品概述

本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）原理，定量检测人血清、血浆、细胞培养上清或组织匀浆中的促红细胞生成素（EPO）浓度。适用于科研用途，不可用于临床诊断。

检测原理

包被与捕获：微孔板预包被抗人EPO抗体，可特异性结合样本中的EPO。

酶标反应：加入HRP标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色测定：底物TMB在过氧化物酶催化下显蓝色，终止液（硫酸溶液）作用后转为黄色，450nm波长下测定吸光度（OD值），OD值与EPO浓度呈正相关。

试剂盒组成

标准品：冻干粉需用蒸馏水复溶至400mIU/mL，梯度稀释后使用。

酶标试剂：HRP标记的检测抗体（避光保存）。

浓缩洗涤液：20倍稀释后使用。

终止液：2M硫酸溶液。

其他：微孔板、封板膜、说明书等。

样本处理

血清：室温静置30分钟后，3000rpm离心10分钟，分离上清。

血浆：EDTA/肝素抗凝全血，3000rpm离心30分钟取上清。

细胞上清：直接3000rpm离心10分钟去除颗粒。

组织匀浆：PBS冲洗后匀浆，离心取上清。

注意：避免反复冻融，-20℃保存。

操作步骤

加样：

空白孔：加稀释液100μL。

标准孔/样本孔：分别加入标准品或样本100μL。

孵育：37℃温育2小时，洗板5次。

加酶标抗体：每孔加HRP标记抗体50μL，37℃孵育1小时，洗板5次。

显色：每孔加TMB底物90μL，避光反应15-30分钟。

终止：加终止液50μL，15分钟内测定OD值。

结果计算

以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过曲线方程计算样本EPO浓度。

注意事项

试剂使用前需平衡至室温，避免交叉污染。

终止液为强酸，需谨慎操作。

若样本浓度过高，需用稀释液调整至检测范围内。

公司出售的产品